IHEM   20887
INSTITUTO DE HISTOLOGIA Y EMBRIOLOGIA DE MENDOZA DR. MARIO H. BURGOS
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Nuevos avances sobre la acción leishmanicida de lactonas sesquiterpénicas.
Autor/es:
BARRERA P; SOSA MA
Lugar:
Bogotá
Reunión:
Congreso; XX Congreso Latinoamericano de Parasitología y XV Congreso Colombiano de Parasitología y Medicina Tropical.; 2011
Resumen:
Introducción: Leishmania mexicana causa leishmaniasis cutánea, y cumple su ciclo de vida entre amastigote intracelular (vertebrados) y promastigote extracelular (vector). Estos parásitos presentan glicoconjugados (gp63) sobre su superficie, como factores de virulencia, y la actividad de GDP-manosa pirofosforilasa (GDP-MP) es esencial para su síntesis. Por otro lado, estos parásitos tienen un precario sistema defensivo contra ROS. Los compuestos leishmanicidas más efectivos son de limitado uso por su alta citotoxicidad. Hemos demostrado previamente que las lactonas sesquiterpénicas (STLs) helenalina, mexicanina (Mxc) y dehidroleucodina (DhL) son activas sobre L. mexicana, afectando su crecimiento y viabilidad, e induciendo apoptosis. La presencia de -metileno--lactona, reactivo con grupos tioles, podría justificar una acción oxidativa de los compuestos y en este trabajo hemos tratado de investigar ese posible mecanismo. Métodos: Promastigotes fueron cultivados en medio Diamond, (fase proliferativa) en presencia o ausencia de los compuestos. Alícuotas de los cultivos fueron recolectadas cada 24 hs y se estudió la proliferación y viabilidad de los parásitos,o procesadas para estudios ultraestructurales. La expresión de factores de virulencia fue analizada por Western blot y también se evaluó la capacidad de infectar células de mamíferos. Para estudiar un posible efecto oxidante de las STLs, se hicieron ensayos en presencia de reductores (GSH) y se evaluó la producción de ROS con la sonda fluorescente H2DCFDA. Los datos fueron analizados por ANOVA/Dunnett, o ANOVA / Bonferroni. Resultados: Corroboramos que las STLs inhiben el crecimiento de los parásitos a bajas concentraciones,y en algunos casos, fue acompañado por alteraciones ultraestructurales. Las STLs afectaron la infectividad de L. mexicana posiblemente por alteración en la expresión de gp63 y GDP-MP. Se observó que GSH bloquea el efecto de las STLs, y DhL aumentó significativamente la generación de ROS en los parásitos, mientras que el efecto de Mxc fue leve. Conclusiones: Las STLs actúan como leishmanicidas por múltiples efectos y demostramos que uno de los mecanismos es la generación de ROS en los parásitos.