Changes in the membrane of bull spermatozoa during epididymal maturation

AGUILERA AC; CARVELLI L; BANNOUD N; SOSA MA

San Juan

Congreso; XXIX Reunión Anual de la Sociedad de Biología de Cuyo; 2011

Sociedad de Biología de Cuyo

El epidídimo de mamíferos participa en la maduración de espermatozoides por medio de enzimas que catalizan cambios moleculares en los gametos. Se propone estudiar la composición de los espermatozoides de las diferentes regiones de epidídimo de toro. Esto involucra la medición de enzimas hidrolíticas y las caracterización de glicoproteínas asociadas a los espermatozoides. Métodos: Epidídimos frescos de toros adultos (Aberdeen Angus) fueron divididos en caput, corpus y cauda y procesadas separadamente. El tejido fue cortado en pequeños trozos y los espermatozoides fueron colectados desde sedimentos, luego de centrifugaciones. La actividad de -N-acetil-glucosaminidasa (NAG), -manosidasa (MAN), -galactosidasa (GAL) y -glucosidasa (GLU) fueron medidas. Para evaluar el contenido en fucosa en las glicoproteínas espermáticas se utilizó una lectina (UEA-I), conjugada con biotina (para Western blot) o FITC (microcopía de fluorescencia y citometría de flujo). Resultados: La actividad de NAG es mayor que las otras enzimas y está enriquecida en los espermatozoides de cauda. MAN, en cambio, disminuye progresivamente desde caput a cauda. Además, se observaron cambios en la calidad y cantidad de proteínas fucosiladas entre las diferentes regiones. El patrón proteico muestra una posible remoción de fucosa en varias proteínas de membrana de espermatozoides de cauda,en contraste con un enriquecimiento en una proteína de  50 kDa. Por microscopia de fluorescencia y citometría de flujo, observamos una disminución progresiva de fucosa a medida que los espermatozoides transitan por el epidídimo. Concluimos que la composición proteica de espermatozoides de toro podría variar en su tránsito por el epidídimo y el contenido de fucosa podría significar un parámetro de maduración espermática.