PROTEíNAS Y CORRIENTES EN CANALES DE SODIO

ITUARTE L; VIERA B; ZANETTI MN; SARAVÍ F; SALDEÑA T

San Juan

Congreso; 2da Reunión Conjunta de Sociedades de Biología de la República Argentina; 2011

SOCIEDAD ARGENTINA DE BIOLOGÍA

Introducción: Las modificaciones fisiológicas que se producen en episodios hipóxicos, desempeñan un papel preponderante en los trastornos del ritmo cardíaco durante los episodios de hipoxia aguda e isquémicos a largo plazo, las modificaciones producidas, causan la prolongación del potencial de acción cardíaco y puede predisponer a individuos a arritmias letales asociado con el síndrome (LQT3) QT – largo. Materiales y métodos Se trabajó con miocitos de ratas macho adulto, Wistar-Hokkaido en atmósfera normal y en cámara de vacío. Se realizaron registros eléctricos en condiciones de clampeo de potencial, aplicando protocolos de pulso de despolarización obteniendo la corriente total transmembrana, antes y después de la aplicación de 6 mM de tetrodotoxina. Se compararon los registros de las corrientes iónicas. Mediante la técnica de análisis por Western Blot, se prepararon homogenatos de cardiomiocitos controles y experimentales en presencia de inhibidores de proteasas, se determinó la concentración proteica por el método de Bradford para determinar la modificación de la síntesis de proteínas de canales en la membrana celular debido a la hipoxia hipobárica crónica. Las muestras fueron corridas en geles de poliacrilamida y transferidas electroforéticamente en membranas de nitrocelulosa. Resultados La hipoxia produce un aumento de la corriente de Nav. La corriente de sodio tetrodotoxina dependiente aumenta con diferencias estadísticamente significativas para un p= 0,005 en los cardiomiocitos de ratas sometidas a régimen de hipoxia hipobárica crónica. Las funciones matemáticas teóricas a partir de los resultados experimentales obtenidas por método de linealización de funciones, para el grupo control y para el experimental tienen la forma y = 1257,4 . x . 10^ 0,01 x y = 598 . x . 10^ 0,01 x El análisis por Western Blot mostró un notable cambio en la expresión de las proteínas tanto de bajo como de alto peso molecular, disminuyendo y aumentando significativamente en ese orden. Conclusiones Los factores constantes de la función exponencial son los que difieren con significancia estadística, pueden ser la medida cuantitativa de la modificación de los canales en la membrana biológica. El cambio en la expresión de las proteínas que muestra la técnica de Western- Blot, sugiere una modificación en la síntesis de las mismas.