Efecto de lactonas sesquiterpénicas y 5-epi-icepetexone en el crecimiento intracelular de Trypanosoma cruzi

ESTEBAN LOZANO, PATRICIA BARRERA, ISRAEL VEGA, MATÍAS NIETO, CARLOS TONN, RENATO A. MORTARA, ULRIKE KEMMERLING, MIGUEL A. SOSA

Ascochinga-Cordoba-Argenrina

Congreso; XXIV Reunión Anual Científica Anual. Sociedad Argentina de Protozoología; 2010

La enfermedad de Chagas es un problema importante para la salud en América Latina y es causada por el parásito unicelular T. cruzi. Los fármacos utilizados hasta ahora contra el parásito han sido ineficaces para la fase crónica de la enfermedad y además presentan muchos efectos colaterales. En este trabajo se ha estudiado el efecto de tres lactonas sesquiterpénicas (dehidroleucodina, helenalina y mexicanina) y un diterpeno (5-epi-icetexona) purificados de plantas de la zona Cuyo, sobre parásitos intracelulares (cepa Y) cultivados en células Vero. Tripomastigotes de T. cruzi (cepa Y), obtenidos por envejecimiento de cultivos de epimastigotes fueron agregados a células de mamíferos (60% de confluencia) cultivadas sobre cubreobjetos en discos (10:1 parásitos:célula) en medio RPMI, durante 4 horas. Luego de remover los parásitos no internalizados, las células infectadas fueron cultivadas en ausencia o presencia de los compuestos (0-4 μM) durante 24-72 hs. El medio fue recolectado cada 24 para el  conteo de parásitos liberados (tripomastigotes). Las células infectadas (a las 24, 48 o 72 hs) fueron fijadas con metanol y teñidos con Giemsa. Se determinó el porcentaje de células infectadas y el número de parásitos por célula mediante microscopía óptica. Observamos que los compuestos inhiben la proliferación de amastigotes dentro de las células, ya que el número de parásitos por célula es más bajo en comparación con los controles, a las 48 horas de tratamiento. Este efecto se observa a concentraciones muy bajas (1.5 a 3.8 μM), que son de baja citotoxicidad para las células hospedadoras. Además, los compuestos provocaron una marcada disminución en el porcentaje de células infectadas (p< 0.001). Los tratamientos a las 48 hs también reducen significativamente (p<0.01 y p<0.001) la presencia de tripomastigotes en el medio extracelular, lo que sugiere un efecto sobre la liberación de parásitos o sobre su vitalidad. En todos los casos, helenalina fue el compuesto más potente. Concluimos que estos compuestos son eficaces contra las formas intracelulares de T. cruzi, inhibiendo la proliferación de amastigotes, aunque un efecto adicional en la diferenciación de los parásitos puede ser posible.