Estabilidad de araujiaina en sistemas continuos con baja actividad de agua.

EVELINA QUIROGA; MARÍA CECILIA ARRIBÉRE; NORA PRIOLO; SONIA BARBERIS

Buenos Aires, Argentina

Congreso; I Congreso Latinoamericano de Fitoquímica. IV Reunión de la Sociedad Latinoamericana de Fitoquímica; 2002

Sociedad Latinoamericana de Fitoquímica

El objetivo de este trabajo fue estudiar la estabilidad de araujiaina en sistemas continuos con baja aw (0,5), y seleccionar aquellos medios en donde la enzima expresó su mayor velocidad esterolítica e inhibió su velocidad hidrolítica, para su aplicación a la síntesis de péptidos.  Los solventes orgánicos utilizados se seleccionaron por medio de un diseño estadístico que permitió agrupar 70 solventes según sus parámetros físicoquímicos similares. La estabilidad de araujiaina se determinó como actividad caseinolítica residual (pH 8, 40°C y 3 h), usando caseína (1%) y Cys (12 mM) como activador. Las velocidades hidrolíticas y esterolíticas se analizaron utilizando (L-pyroglutamyl-L-phenylalanyl-L-leucine-p-nitroanilide) y los derivados N-CBZ-(Gly, Gln y Asp)-p-nitrofenilados como sustratos. Sólo en propanona, acetonitrilo, clorobenceno, etanol, metanol y octanol, araujiaina se mantuvo por 3h, aunque con valores menores a 92 % respecto de agua. Por otra parte, la enzima no hidrolizó el sustrato peptídico sintético en dichos medios. Sorprendentemente, algunos sistemas continuos que inhibieron la velocidad inicial hidrolítica permitieron expresar actividad esterolítica.  De lo anterior se desprende que los medios continuos más promisorios para la síntesis de péptidos, catalizada por araujiaina (aw: 0,5), son etilenglicol, acetonitrilo y THF.