La proteína PPR EMB2794 afecta el trans-splicing de nad2 y el ensamblaje del complejo I mitocondrial en Arabidopsis thaliana

MARCHETTI, FERNANDA; TAKENAKA M; PAGNUSSAT, GABRIELA C; CAINZOS MAXIMILIANO; BRENNICKE AXEL; ZABALETA, EDUARDO; CORDOBA JUAN PABLO; OSTERSETZER OREN

Mar del Plata

Encuentro; XIV Encuentro Biólog@s En Red; 2019

AJIF

El genoma de Arabidopsis codifica más de 450 proteínas que contienen el motivo de repeticiónpentatricopeptídica (PPR). Las proteínas PPR se clasifican en dos grupos, denominadas clases P y PLS. Las proteínas de la subclase PLS están involucradas principalmente en la edición de ARN de las transcripciones mitocondriales y de cloroplastos, mientras que la mayoría de las proteínas de la subclase P analizadas se han asociado principalmente al metabolismo del ARN, participando en eventos de estabilización y procesamiento de transcriptos, al corte y empalme (splicing) y a la traducción. Las mutaciones de los genes PPR a menudo resultan en defectos en la embriogénesis y en fenotipos alterados para el desarrollo de las plántulas. Sin embargo, solo se ha caracterizado en detalle un número limitado de mutantes ppr. En este trabajo, mostramos que las mutaciones nulas en el gen EMB2794 provocan retraso en el desarrollo del embrión, debido a la alteración en el splicing del transcripto nad2 dentro de las mitocondrias de Arabidopsis thaliana. En las angiospermas, el gen nad2 tiene cinco exones que se transcriben individualmente de dos regiones de ADNmt. Los análisis bioquímicos indican que la proteína recombinante EMB2794 se une a los dos pre-ARNm de nad2 in vitro, lo que sugiere un papel para esta proteína en el trans-splicing del intrón 2 nad2. Las líneas homocigotas emb2794, que muestran fenotipos con defectos en la embriogénesis, pueden rescatarse parcialmente mediante la adición de sacarosa al medio de crecimiento. Las mitocondrias de plantas mutantes homocigotas rescatadas contienen solotrazas del complejo I y carecen de actividad NADH-deshidrogenasa.