CLONADO Y PURIFICACIÓN DE LAS PROTEÍNAS CON DOMINIOS DC1 VACUOLELESS GAMETOPHYTES Y BINUCLEATE POLLEN DE ARABIDOPSIS THALIANA

SALVADOR LORENZANI; DIEGO FERNANDO FIOL; JESICA FRIK; CLAUDIA ANAHÍ CASALONGUÉ

Mar del Plata

Encuentro; XIV Encuentro Biólog@s En Red; 2019

UNMDP

Los dominios DC1 son exclusivos de plantas y se denominanasí por la similitud que presentan con los dominios C1 existentes en proteínasde animales, los cuales tienen la capacidad de unir lípidos de membrana y deactuar como módulos de interacción proteína-proteína. Sin mbargo, todavía no ha sido demostrada la función de los dominios DC1. Previamente en nuestrolaboratorio se identificaron y caracterizaron funcionalmente dos proteína quecontiene dominios DC1, codificadas por los genes At2g17740 y At2g44370, a laque denominamos VLG, por Vacuoleless gametophytes y BNP, por Binucleate pollen, respectivamente. VLG y BNP se localizanen compartimentos prevacuolares y participarían en la formación de ensambladosmultimoleculares involucrados en procesos relacionados a la dinámica de endomembranas,incluyendo la formación de vacuolas y la regulación del transporte al núcleo deotras proteínas. Estas proteínas mostraron además ser necesarias para eldesarrollo de los gametofitos femenino (VLG) y masculino (VLG y BNP). Elobjetivo de este trabajo es determinar la capacidad de unión de los dominiosDC1 a posibles ligandos lipidicos. Para esto se realizó el clonado y seoptimizó la purificación de ambas proteínas en sistemas de expresión bacterianopara su posterior purificación. Posteriormente, las proteínas purificadas se utilizarán en ensayos de fat-blot para la determinación de sus capacidades deunión a lípidos de membrana. Financiamiento: ANPCyT, UNMdP, Conicet, CIC-PBA.