Analisis por Western blot de metalotioneínas en Palaemonetes argentinus (Crustacea, Palaemonidae) expuesto a distintas concentraciones de cadmio.

CHIODI, LEILA; MENDIETA, J.; CHISARI A.; GERPE, MARCELA

Lima. Perú

Congreso; IX Congreso de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC LA) (II Congreso SETAC Perú) – Ecotoxicología y Responsabilidad Social. Sociedad de Toxicología y Química Ambiental Latina (SETAC LA).; 2009

1. IX Congreso de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC LA)

Las metalotioneínas son proteínas citosólicas de bajo peso molecular, con altos porcentajesde cisteína (-SH) y termoestables. Están involucradas en la homeostasis y detoxificación demetales divalentes, pudiendo ser su síntesis de novo inducida tanto por metales esencialesen exceso (cinc, cobre) como por metales sin funciones fisiológicas conocidas (cadmio). Elobjetivo de este trabajo fue evaluar la inducción de metalotioneínas en el camarón de aguadulce Palaemonetes argentinus expuesto a cadmio. Individuos juveniles fueron mantenidosdurante 24 horas a concentraciones crecientes de CdCl2 acuoso (0, 0.05, 0.1, 0.5 y 1.0mg/l). A partir de cada ejemplar se obtuvo el tejido muscular y el tejido visceral, los cualesse analizaron en pooles por concentración (n: 50 individuos/pool). Los tejidoshomogeneizados con solución salina (NaCl 0.9%) fueron calentados a 80°C durante 10minutos, obteniendo la fracción de proteínas termoestables. Las mismas fueroncuantificadas por el método colorimétrico microbicinconínico. Cantidades iguales deproteínas (60 ug) fueron separadas mediante electroforesis en geles desnaturalizantes depoliacrilamida 12 % (SDS-PAGE). La detección de metalotioneínas fue realizada mediantela técnica de Western blot utilizando el anticuerpo primario anti-MT y el anticuerposecundario fluorescente Zy-MaxTM. Las bandas obtenidas fueron cuantificadas con elprograma ImageQuant 5.2. Los resultados obtenidos en músculo revelaron un aumento enlos niveles de metalotioneínas dependiente de la dosis de cadmio, mientras que estatendencia no fue tan clara en el tejido visceral. Esto podría estar indicando una regulacióndiferencial de estas proteínas en ambos tejidos en presencia de cadmio.