MENEW, UNA PROTEÍNA CON DOMINIOS DC1, ES ESENCIAL PARA LA MICROGRAMETOGÉNESIS

CASALONGUE, CA; PAGNUSSAT GC; ARIAS LA; FIOL DF; D IPPOLITO, S.

Rosario

Simposio; Simposio Genómica Funcional de Plantas,; 2017

En este trabajo se identificó una proteína con dominios DC1 esencial para la microgametogénesis a la que se llamó MENEW. Los dominios DC1, que se encuentran exclusivamente en plantas, son estructuralmente similares a los dominios C1 de unión a diacilglicerol, aunque su función es aún desconocida. El estudio de dos líneas alélicas independientes de Arabidopsis con inserciones en MENEW permitió determinar que esta proteína es requerida para el desarrollo del gametofito masculino o microgametofito. Un análisis detallado de las distintas etapas de desarrollo del microgametofito utilizando tinciones con DAPI mostró que los granos de polen mutantes no completan la mitosis II; su desarrollo se detiene en el estadio bicelular y no son capaces de germinar. Mediante la construcción y análisis de líneas reporteras pMENEW:GUS se caracterizó la expresión de MENEW, encontrándose una alta actividad del promotor en el tejido vascular de todos los órganos, los tejidos en expansión, la inflorescencia y en granos de polen. Mediante la expresión transiente en hojas de Nicotiana benthamiana de pMENEW:MENEW-GFP se determinó que la proteína en estudio se localiza en vesículas del sistema de endomembranas positivas para el marcador de endosomas tardíos RFP-Rha1. Mediante ensayos de doble híbrido en levadura y experimentos de complementación bimolecular de la fluorescencia (BiFC), se demostró que MENEW interactúa con los factores de transcripción VOZ1 y VOZ2, involucrados en el desarrollo de polen y de la floración, entre otros procesos. Estos resultados sugieren que MENEW podría funcionar mediando la translocación de los factores de transcripción VOZ1 y VOZ2 durante el desarrollo del microgametofito.Financiado por ANPCyT (PICT 1524), CIC-PBA, Conicet (PIP 0200) and UNMdP.