Estudio del complejo ADXR-ADX-P450 en la síntesis de hormonas esteroideas y la gametogénesis femenina

AYELEN M. DISTÉFANO; ANDRES M. BELLIDO; DIEGO F. FIOL; EDUARDO J. ZABALETA; GABRIELA C. PAGNUSSAT

MAR DEL PLATA

Congreso; XV CONGRESO LATINOAMERICANO XXX REUNION ARGENTINA DE FISIOLOGIA VEGETAL; 2014

SAFV

Hemos identificado que mutantes de Arabidopsis que tienen una inserción en el gen codificante para la adrenodoxina reductasa (ADXR), presentan un defecto en la gametogénesis femenina. En animales, ADXR junto a una adrenodoxina (ADX) y a un citocromo P450 (P450), constituyen un sistema de transporte de electrones mitocondrial requerido para la síntesis de esteróides. Nuestra hipótesis es que el complejo ADXR-ADX-P450 también estaría involucrado en la síntesis de esteroides en plantas, los que serían fundamentales para la gametogénesis femenina. Arabidopsis tiene una ADXR y dos ADX en mitocondrias, pero no se han descripto aún P450 en mitocondrias. Realizamos un estudio bioinformático de predicción de localización subcelular y encontramos que de los 244 P450 de Arabidopsis, 14 serían mitocondriales. Para confirmar la localización realizamos fusiones traduccionales a GFP y la localización fue estudiada por expresión transiente en Nicotiana Benthamiana. Un estudio de doble híbrido mostró que ADX1 interacciona con un P450. Esta interacción fue corroborada por ensayos de BiFC. El siguiente objetivo es analizar el fenotipo de mutantes de los P450 que interactuarían con ADX y estudiar si el agregado de esteroides rescata el fenotipo de las mutantes de ADXR y de P450, si es que las últimas tuviesen algún fenotipo.