Producci¨®n de un agente antimicrobiano con potencial actividad tensioactiva mediante el empleo de tecnolog¨ªas amigables con el medio ambiente

FAIT E; GARROTE G L; CLAP¨¦S P; MORCELLE S R

AUGM DOMUS

Asociaci¨®n de Universidades Grupo Montevideo

Año: 2012 vol. 4 p. 49 - 61

1852-2181

Papa¨ªna es una endopeptidasa extra¨ªda del l¨¢tex de frutos de Carica papaya ampliamente empleada en las industrias alimentaria y farmac¨¦utica. Es muy utilizada como biocatalizador en la s¨ªntesis de p¨¦ptidos y otros derivados. Los surfactantes derivados de arginina son una familia de tensioactivos cati¨®nicos con propiedades antimicrobianas interesantes como preservativos para formulaciones farmac¨¦uticas y alimentarias. El objetivo del presente trabajo fue la obtenci¨®n de un tensioactivo derivado de arginina con actividad antimicrobiana empleando papa¨ªna como biocatalizador. La s¨ªntesis se llev¨® a cabo por condensaci¨®n del ¨¦ster et¨ªlico de Na-benzoil-arginina con dodecilamina como nucle¨®filo, utilizando papa¨ªna adsorbida sobre poliamida como biocatalizador y acetonitrilo con 0.25% (v/v) de agua como medio de reacci¨®n. El producto (Bz-Arg-NHC12) fue purificado mediante cromatograf¨ªa de intercambio cati¨®nico utilizando como eluyente una mezcla de buffer b¨®rico-borato 0.01 M (pH 8.5)/etanol (1:1) y un gradiente en NaCl. Se ensay¨® la actividad antimicrobiana mediante el m¨¦todo de microdiluci¨®n frente a Salmonella enterica, Serratia marcescens, Shigella flexneri, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Bacillus cereus, Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Kocuria rhizophila, Listeria innocua, Listeria monocytogenes, Pichia anomala, Saccharomyces cereviciae, Kluyveromyces marxianus y Rhodothorula sp., calcul¨¢ndose los porcentajes de inhibici¨®n de crecimiento y las concentraciones inhibitoria m¨ªnima (CIM) y bactericida m¨ªnima (CBM). La s¨ªntesis de Bz-Arg-NHC12 catalizada por papa¨ªna adsorbida en poliamida tuvo una conversi¨®n del 86.2%. El compuesto puro present¨® una CIM de 15.6 ¦Ìg.ml-1 para B. cereus, 62.5 ¦Ìg.ml-1 para St. aureus y 250.0 ¦Ìg.ml-1 para E. coli, en tanto que no afect¨® el crecimiento de Ps. aeruginosa. Las CBM fueron 250.0 ¦Ìg.ml-1, 62.5 ¦Ìg.ml-1 y 250.0 ¦Ìg.ml-1 para B. cereus, St. aureus y E. coli respectivamente. Se determin¨® la actividad antimicrobiana de una soluci¨®n acuosa de Bz-Arg-NHC12 (60.0 ¦Ìg.ml-1) frente a distintas especies de bacterias y levaduras. Los microorganismos Gram positivos resultaron en general inhibidos en m¨¢s de un 90%, en tanto las bacterias Gram negativas y levaduras ensayadas fueron resistentes.