Interacción Funcional entre el Complejo I y la NOS mitochondrial.

BOMBICINO SS; IGLESIAS DE; ZAOBORNYJ T; BOVERIS A; VALDEZ LB

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; XL Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Biofísica; 2011

Sociedad Argentina de Biofísica

Los complejos de la cadena respiratoria están conectados formando supercomplejos, los cuales son esenciales para el ensamblaje y estabilidad del complejo I. Se ha mostrado que la óxido nítrico sintasa mitocondrial (mtNOS) se encuentra asociada a la citocromo oxidasa (complejo IV) y que proteínas del complejo I co-inmunoprecipitan con la mtNOS. Se ha propuesto que la mtNOS se halla adyacente al complejo I pudiendo interactuar funcionalmente con el mismo. El objetivo de este trabajo fue estudiar la interacción funcional entre el complejo I y la mtNOS usando partículas fosforilantes ETPH-Mg2+ de corazón de vaca, las cuales exponen la NADH-deshidrogenasa y mtNOS al medio circundante, debido a la orientación inversa de la membrana mitocondrial interna. En presencia de succinato y ATP, necesarios para establecer el flujo reverso de electrones, las ETPH-Mg2+ presentaron una actividad NAD+ reductasa de 13.50.9 nmol/min.mg prot. Esta actividad fue inhibida por adición de rotenona (88%), antimicina (77%), oligomicina (98%) y m-CCCP (93%). La velocidad de producción de NO por las ETPH-Mg2+ fue de 0.63 +/- 0.03 nmol/min.mg prot., detectada (90%) aún en ausencia de un dador exógeno de electrones como el NADPH. Aunque la rotenona inhibió la producción de NO por ETPH-Mg2+ (86%) no pudo reducir la actividad de la nNOS aislada (0.93 +/- 0.05 nmol NO/min.UE), sugiriendo que el efecto inhibitorio observado fue debido a una inhibición en el flujo de electrones y no a una acción directa sobre la estructura de la NOS. La dependencia de la actividad de mtNOS con el estado metabólico y el potencial de membrana6, y la interacción funcional observada entre el complejo I y la mtNOS, avalan la hipótesis que la mtNOS podría utilizar electrones provenientes de la cadena respiratoria como vía alternativa a su propio dominio reductasa.