Bacterias del genero Actinomycetales ejercen un efecto inhibitorio sobre células epiteliales humanas de mucosas

PAOLA SMALDINI; JOHN L STANFORD; CARLOS FOSSATI; GUILLERMO H DOCENA

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y la LVII Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

SAI

Las bacterias del género Actinomycetales son bacterias Gram positivas saprófitas que poseen efecto inmunomodulatorio en distintas situaciones patológicas. El objetivo del trabajo es estudiar el efecto que los actinomycetales (Gordonia bronchialis-Gb y Rhodococcus coprophilus-Rc) ejercen sobre células epiteliales de mucosas activadas con agentes pro-inflamatorios. Se emplearon líneas celulares de epitelio de mucosa de pulmón e intestino humano (A549 de pulmón, Caco-2 y Caco luciferasa de intestino). Como estímulos pro-inflamatorios se empleó flagelina-Flic, y citoquinas pro-inflamatorias IL-1β y TNF-α. Como readout del sistema se midió la emisión de luz y la inducción de citoquinas, kimoquinas y TLR por RT-PCR y PCR tiempo real. Como inmunomoduladores bacterianos se emplearon los Actynomicetales (Gb y Rc) muertas por calor. En el sistema Caco luc la emisión de luz está acoplada a la activación de la vía de NF-KB e inducción del promotor de CCL20. Se observó que células Caco luc responden a Salmonella typhimurium muerta y viva, pero no a Gb y Rc muertas. Sin embargo, cuando Caco-2-luc son pre-activadas con distintos estímulos pro-inflamatorios expresan TLR2, 4 y 9, y responden a las bacterias muertas, observándose una inhibición dosis-dependiente. Caco-2 y A549 estimuladas con IL-1β, TNF-α y Flic responden en forma diferencial induciendo IL-1β, IL-6, TNF-α, CCL20, IL-8 y MCP-1. Sin embargo, cuando son co-cultivadas con Gb y Rc sólo se observa inhibición significativa en la inducción IL-1β, CCL20 e IL-8. Estos resultados indican que las bacterias Gordonia bronchialis y Rhodococcus coprophilus muertas ejercen un efecto inhibitorio sobre la activación in vitro de células epiteliales en un entorno inflamatorio. Inhiben la vía de señalización intracelular NF-KB y la secreción de citoquinas y kimoquinas pro-inflamatorias. Sobre la base de estos resultados se plantea el empleo de estas bacterias muertas en distintas condiciones inflamatorias.