Análisis de expresión de genes indicadores de activación inmunológica en mucosa de injerto intestinal

ZAMBERNARDI A; MEIER D; SCHIFFRIN M; RUMBO C; NACHMAN F; CABANNE A; CAGNOLA H; SOLAR H; DOCENA GUILLERMO H.; CHIRDO FERNANDO; RUMBO M; GONDOLESI G

Congreso; XXI Congreso Latinoamericano y del. Caribe de Trasplante; 2011

En el transplante de órganos sólidos, el intestino presenta una de las frecuencias más altas de rechazos celulares agudos (RCA). El diagnóstico de RCA se realiza combinando el análisis endoscópico, anatomo-patológico y clínico, sin que existan marcadores bioquímicos que complementen este resultado. Con este fin, se realizan endoscopías y biopsias en forma protocolizada durante el seguimiento. El objetivo de este trabajo fue estudiar la expresión de genes en la mucosa intestinal para caracterizar la respuesta de RCA y colaborar en el diagnóstico diferencial. En los procedimientos de seguimiento, una biopsia se destinó para extracción de RNA y empleando primers específicos por RT-qPCR se midió la expresión relativa de interferón gamma (ifng), cxcl10, cxcl11, ccl20, cxcr3 y mx-1. Se analizaron 80 muestras de 15 pacientes de las cuales por clínica e histología se dividieron en 5 grupos: normales (36), RCA (20), indeterminadas para RCA (13), enteritis infecciosas (4) y cuadros clínicos extra intestinales (7). La expresión relativa de los marcadores mostró una importante variabilidad, aún dentro de los grupos analizados. Durante episodios de rechazo ifng, cxcl10 y cxcl11, citoquinas características de una respuesta Th1, mostraron una tendencia a incrementar su expresión correlacionando con la severidad del episodio, mostrando un aumento de 8.3±4.3; 18.9±13.5; 11.4±3.7 respectivamente en el grupo de rechazo agudo severo comparado con las muestras normales (p<0.002). Ninguno de los genes estudiados demostró especificidad durante los episodios de RCA, dado que se observaron incrementos en otras situaciones analizadas. El marcador mx1, implicado en la respuesta antiviral mostró incremento tanto en enteritis virales como en cuadros de RCA. Cxcr3 mostró muy poco cambio en su expresión relativa en todos los grupos, mientras que ccl20 mostró incremento en su expresión relativa tanto en episodios de RCA, enteritis y cuadros indeterminados. Las células T y la producción de quimioatractantes a nivel local juegan un papel fundamental durante el  RCA. De acuerdo al esquema de inmunosupresión aplicado en cada caso se observaron variaciones en los niveles de los marcadores analizados. El análisis de un número mayor de muestras asociado el estudio detallado de las variables clínicas, serán de utilidad para mejorar la comprensión de los fenómenos inmunológicos en el post-TX intestinal y eventualmente hallar un marcador biológico de utilidad para el diagnóstico de RCA y la adecuación del tratamiento inmunosupresor.