Evaluaci¨®n de la alergenicidad de prote¨ªnas de soja recombinantes en un modelo murino de alergia a leche de vaca

CURCIARELLO RENATA; CANDREVA ANGELA; SMALDINI PAOLA; FOSSATI CARLOS; PETRUCCELLI SILVANA; DOCENA GUILLERMO

Congreso; LIX Reuni¨®n Anual de la Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa; 2011

La inmunoterapia alergeno espec¨ªfica para el tratamiento de las alergias alimentarias tiene como fin alterar la respuesta al¨¦rgica al alimento nocivo mediante la administraci¨®n del alergeno por una mucosa. Nuestro grupo ha descripto previamente la reactividad cruzada (RC) inmunoqu¨ªmica ente prote¨ªnas de soja (PS) y de leche de vaca (PLV), para explicar la intolerancia a PS en pacientes al¨¦rgicos a LV. Para evitar los efectos adversos de la inmunoterapia suelen emplearse prote¨ªnas modificadas o p¨¦ptidos en lugar del alergeno. El objetivo del presente trabajo es estudiar la alergenicidad cruzada de distintas prote¨ªnas y/o p¨¦ptidos recombinantes de soja utilizando un modelo murino de alergia a PLV. Se obtuvieron 3 prote¨ªnas recombinantes de soja : P34, P28 y la subunidad ¦Á de ¦Â-conglicinina, y 2 p¨¦ptidos derivados de ¨¦sta: ¦Á-CTD, que contiene el dominio C-terminal, y el p¨¦ptido PA, que contiene un epitope inmunorreactivo de RC. Se sensibilizaron ratones Balb/c por v¨ªa oral con PLV y toxina col¨¦rica (grupo ¡°sens¡±) o s¨®lo con PLV (grupo ¡°control¡±) y se evalu¨® la respuesta humoral y celular (IgE, IgG1, IgG2a, IL-5, INF-¦Ã, histamina plasm¨¢tica) prueba cut¨¢nea (PC) y signos cl¨ªnicos compatibles con una respuesta de tipo Th2, luego de un desaf¨ªo oral con PLV o PS. Los animales sensibilizados mostraron niveles elevados de anticuerpos IgE e IgG1 espec¨ªficos a PLV que reconocieron distintos componentes recombinantes de PS. A partir de esplenocitos estimulados con las distintas prote¨ªnas recombinantes se demostr¨® la presencia de linfocitos T (LT) espec¨ªficos de PLV con capacidad de ser estimulados con PS. Se cuantific¨® la secreci¨®n de IL-5 (P34 12¡À5 vs 2¡À0.1 pg/ml; P28 nd vs. 4¡À0,1 pg/ml; ¦Á 76,3¡À15 vs. 26,2¡À10 pg/ml; ¦Á-CTD 5,5¡À3 vs. nd pg/ml y PA 9,65¡À10 vs. nd pg/ml, sens vs control). Las PC para P34, ¦Á y ¦Á-CTD fueron positivas, mientras que P28 y PA dieron PC negativas. En conclusi¨®n, las prote¨ªnas de soja que previamente mostraron RC inmunoqu¨ªmica frente a distintos anticuerpos espec¨ªficos de PLV, y en las que identificamos p¨¦ptidos inmunodominantes y posiciones aminoac¨ªdicas cr¨ªticas para la RC, en este trabajo evidenciaron una alergenicidad cruzada in vivo en un modelo murino de alergia a PLV. Adem¨¢s, el p¨¦ptido PA, mostr¨® capacidad de activar LT y no indujo degranulaci¨®n de mastocitos en piel, indicando que este p¨¦ptido contiene un epitope T y un epitope B. Estos resultados sugieren que PA podr¨ªa ser un candidato para una vacuna tolerizante.