Efecto inmunomodulatorio in vivo que bacterias Actinomicetales ejercen en inflamaci¨®n intestinal

ORSINI LUC¨ªA; SMALDINI PAOLA; STANFORD JOHN; HIRIART YANINA; FOSSATI CARLOS; DOCENA GUILLERMO H.

Congreso; LIX Reuni¨®n Anual de la Sociedad Argentina de Inmunolog¨ªa; 2011

El epitelio intestinal es un elemento esencial como barrera f¨ªsica y como componente activo del sistema inmune intestinal, cumpliendo un rol central en el mantenimiento de la homeostasis intestinal. Una alteraci¨®n de la misma puede inducir una respuesta inflamatoria y llevar a una enfermedad intestinal (alergia alimentaria o enfermedad inflamatoria intestinal). El objetivo de este trabajo es estudiar la capacidad inmunomodulatoria de bacterias del g¨¦nero Actinomicetales, Gordonia bronchialis (Gb) muertas por calor, sobre la inflamaci¨®n intestinal. Se indujo en ratones BALB/c una inflamaci¨®n intestinal empleando flagelina (Flic) por v¨ªa intraluminal, o toxina col¨¦rica por v¨ªa oral, y Gb (10^7 bacterias muertas por calor) como inmunomodulador. Se estudi¨® la v¨ªa de NF-¦ÊB por microscopia de fluorescencia en Caco-2 estimuladas con Flic en presencia o ausencia de Gb. Adem¨¢s Gb fue empleado en el modelo murino de alergia alimentaria (previamente desarrollado) mediante administraci¨®n por v¨ªa oral previo a la sensibilizaci¨®n (PreTGb) o en forma simult¨¢nea (TSimGb). Se analiz¨® la inducci¨®n de signos cl¨ªnicos post-desaf¨ªo oral con LV, los niveles de anticuerpos s¨¦ricos espec¨ªficos y la secreci¨®n de citoquinas por esplenocitos. Observamos que Gb no es fagocitado por los enterocitos e inhibe la traslocaci¨®n de p65 al n¨²cleo en Caco-2 estimuladas con Flic. Por otro lado, se observ¨® un aumento de mRNA intestinal para Ccl20 con Flic y con TC, cuya expresi¨®n se inhibi¨® en presencia de Gb (FI 3.72¡À0.19 vs 1.94¡À0.33, Flic vs Flic+Gb, p<0.01; 3.70¡À0.33 vs 1.81¡À0.10, TC vs TC+Gb p<0.001). En el modelo de alergia, en los grupos tratados con Gb se observ¨® una disminuci¨®n de los signos cl¨ªnicos desarrollados luego del desaf¨ªo oral con LV, una disminuci¨®n en los niveles s¨¦ricos de IgE especifica a LV con respecto al grupo control [DO 1.47¡À0.12 vs 1.01¡À0.13 (TSimGb) o vs 1.14¡À1.10 (preTGb), p<0.05] y una reducci¨®n en la secreci¨®n de IL-5 [40.98¡À7.14 pg/ml vs 1.63¡À0.10 pg/ml (preTGb); 8.93¡À2.56pg/ml (TSimGb)] en esplenocitos activados con LV. No se observ¨® un aumento de secreci¨®n de IFN¦Ã. En conclusi¨®n, observamos que estos Actinomicetales ejercen un efecto inmunomodulatorio en la inflamaci¨®n intestinal. Este proceso inhibitorio requiere contacto celular y bloquea la activaci¨®n de la v¨ªa intracelular de NF-¦ÊB. Sobre la base de estos resultados planteamos el uso de estas bacterias muertas como una nueva opci¨®n terap¨¦utica para tratar des¨®rdenes inflamatorios gastrointestinales.