ANALISIS INMUNOQUIMICO Y COMPUTACIONAL DE LA REACTIVIDAD CRUZADA ENTRE CASEINAS DE LECHE BOVINA Y PROTEINAS DE SOJA

CURCIARELLO RENATA; GONZALEZ VIRGINIA; PARISI GUSTAVO; PETRUCCELLI SILVANA; DOCENA GUILLERMO H.

Congreso; LVI Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología y Grupo Rioplatense de citometría de flujo; 2008

Estudios previos del grupo caracterizaron la reactividad cruzada entre caseínas bovinas, principal alergeno alimentario en nuestro país, y proteínas de soja, frecuentemente empleadas en el tratamiento de la alergia a leche bovina (LV). Se obtuvieron en forma recombinante los distintos componentes de soja reactivos y un péptido que contiene la región C-terminal de las globulinas 7S, llamado a-CTD. Se planteó identificar las secuencias involucradas en la reactividad cruzada y predecir los epitopes responsables, a partir de la información de secuencias disponibles en bases de datos. Por ELISA de inhibición, empleando un suero policlonal específico de LV y distintos inhibidores de soja, incluyendo a-CTD, se logró desplazar la unión de los anticuerpos específicos de LV, lo cual confirma la reactividad cruzada observada previamente por otros métodos. Además, a-CTD, que incluiría los epitopes responsables de la reactividad cruzada, mostró reactividad por inmunoblotting frente a anticuerpos monoclonales específicos de caseínas bovinas, y por ELISA indirecto frente al suero policlonal y distintos sueros de individuos alérgicos a LV. En el 92,3% de los sueros se reveló la presencia de IgE frente a a-CTD. Sobre la base de estos resultados, se emplearon diversos métodos computacionales de predicción de epitopes para obtener péptidos de proteínas de soja y LV, con los cuales se realizaron análisis in silico para identificar las regiones implicadas en la reactividad cruzada. Por lo tanto las proteínas recombinantes, al igual que sus contrapartidas naturales, mostraron la reactividad cruzada inmunoquimica y se identificaron regiones con similitud secuencial entre las diferentes subunidades de b-conglicinina y las caseínas bovinas. Se propuso un modelo estructural para a-CTD conteniendo las posibles regiones implicadas en la reactividad cruzada observada in vitro.