Mecanismo molecular de internalización cruzada entre los receptores H1 y H2 de histamina

ALONSO N; NOTCOVICH C; FERNANDEZ N; DAVIO C; SHAYO C

Mar del PLata

Congreso; Sociedad Argentina de Investigacion Clinica; 2010

Los receptores a histamina pertenecen a la familia de receptoresacoplados a proteína G (GPCRs). El receptor H1 (rH1) modulala producción de IPs, mientras que el receptor H2 (rH2) regula losniveles de AMPc. Estudios previos de nuestro laboratorio indicanque dichos receptores poseen la capacidad de cointernalizar anteel estímulo con ligandos agonistas como parte de la regulacióncruzada que existe entre ellos. Dado que en otros sistemas hasido descripto que la internalización del rH1 es dependiente decaveolina, mientras que la del rH2 es dependiente de clatrina,el objetivo de este trabajo es evaluar el mecanismo de cointernalizaciónde los rH1 y rH2 en células CHO transfectadas conambos receptores (CHOH1-H2). Al evaluar mediante ensayos deunión el número de sitios receptores de membrana luego de 1 hde tratamiento con los agonistas específicos (2, 3-trifluormetilfenilhistaminapara el rH1 y amthamina para el rH2), observamosque en este sistema la internalización del rH1 estimulada porel agonista H1 es bloqueada en un 100% por filipin (inhibidorde la endocitosis mediada por caveolina). Sorprendentementeeste inhibidor también bloqueo en un 95% la internalización delrH2 estimulada por el agonista H1. Por otro lado, al evaluar lainternalización de los receptores en presencia de una construccióndominante negativa de EPS15, proteína necesaria para lainternalización mediada por clatrina, observamos un bloqueo del75% de la endocitosis del rH2 estimulada por el agonista H2 yuna inhibición del 100% en la cointernalización del rH1 inducidapor el mismo ligando. Por lo tanto estos resultados indican queel mecanismo de cointernalización de los receptores H1 y H2 ahistamina en células CHOH1-H2, no depende del tipo de receptorsino del estimulo aplicado, siendo dependiente de caveolina encaso de ser inducida por agonistas H1 y dependiente de clatrinaen caso de ser inducida por agonistas H2.