LA HISTAMINA A TRAVES DEL RECEPTOR H1 INDUCE INHIBICION DE LA PROLIFERACION CELULAR VIA PLC, RAC Y JNK.

NOTCOVICH CINTIA; DIEZ FEDERICO; TUBIO MARIA ROSARIO; BALDI ALBERTO; KAZANIETZ MARCELO; DAVIO CARLOS; SHAYO CARINA

MAR DEL PLATA

Congreso; LIV REUNION CIENTIFICA ANUAL Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) y LVII REUNION CIENTIFICA Sociedad Argentina de Inmunología (SAI).; 2009

SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLINICA

La señalización clásica descripta para el receptor H1 a histamina (H1R) involucra la activación de la PLC vía Gq. Hemos descripto en células CHO transfectadas con H1R, la activación de Rac1 y RhoA, miembros de la familia de Rho-GTPasas. Estas proteínas han sido asociadas a procesos como secreción, migración, control del ciclo celular y apoptosis. Dado que la histamina modula la proliferación celular a través de H1R, nos planteamos como objetivo, estudiar la asociación entre la activación de Rac1 y RhoA y la modulación de la proliferación celular así como distintas vías de señalización involucradas. Los ensayos fueron realizados en células CHO transfectadas establemente con H1R. La activación por histamina de Rac1 y RhoA (ensayos de pulldown con proteínas que unen Rac y RhoA activas) fue suprimida por U73122, inhibidor de PLC. La histamina vía H1R indujo activación del factor de respuesta a suero determinado por ensayos de gen reportero (SRE-LUC), inhibida en presencia de toxina C3, inhibidor de RhoA. Además detectamos activación de JNK (western blot de proteína fosforilada) inhibida por la construcción 136 MEDICINA - Volumen 69 - (Supl. I), 2009 b2-chimaerin (inhibidor de Rac) y activación de ERK1/2 no inhibida por toxina C3 ni por b2-chimaerin. La histamina no moduló las vías de Akt y p38. La proliferación fue evaluada por incorporación de 3H timidina. Histamina y agonista H1 provocaron una inhibición de la misma en forma dosis dependiente. Este efecto resultó dependiente de la activación de Rac y no de RhoA, dado que fue revertido por inhibidores de Rac (b2-chimaerin e inhibidor farmacológico NSC23766) y no por toxina C3. Asimismo la inhibición de la proliferación fue revertida por U73122 y por el inhibidor de JNK SP600125. Los inhibidores de ERK, U0126 y PD98059 no mostraron ningún efecto. Nuestros resultados revelan un efecto inhibitorio de la histamina sobre la proliferación en células CHO-H1, dependiente de PLC, Rac1 y JNK y sugieren que RhoA y ERK regularían otros procesos río abajo del H1R.