INVESTIGADORES
DAVIO Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
REGULACION DE LOS NIVELES DE AMPC EN CELULAS TUMORALES PANCREATICAS AR42J. ROL DE LAS PROTEINAS ASOCIADAS A RESISTENCIA A MULTIDROGAS (MRPS).
Autor/es:
DIEZ FEDERICO; MIRYAM RODRIGUEZ; GOMEZ NATALIA; GARCIA CORINA; COPSEL SABRINA; SHAYO CARINA; BIANCIOTTI, L; DAVIO CARLOS
Lugar:
MAR DEL PLATA
Reunión:
Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2010
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLINICA
Resumen:
La señalización vía AMPc controla procesos celulares tales
como proliferación, diferenciación y apoptosis, tanto en células
normales como tumorales. La regulación de los niveles intracelulares
de AMPc (AMPci) esta mediada por su degradación a través
de fosfodiesterasas, desensibilización de GPCRs y recientemente
se asoció también a su exclusión por medio de MRPs. En este
trabajo estudiamos dicha regulación en células AR42J frente a
agentes capaces de modular el AMPc. Sus niveles se evaluaron
a través de un ensayo de competición de [3H]AMPc por PKA.
Sorprendentemente, Amtamina (agonista H2) y prostglandina E2
de manera tiempo y concentración dependiente, disminuyen el
AMPci (65% vs basal en ambos casos), mientras que en acinos
pancreáticos normales inducen un incremento del mismo. Por
otra parte, Forskolina y Secretina producen un incremento del
AMPci alcanzando un máximo a los 5 minutos y permaneciendo
elevado por encima del nivel basal por el resto del ensayo (1h).
La acumulación de AMPc extracelular (AMPce) aumenta alcanzando
su máximo nivel a la hora de estimulo. El tratamiento con
Probenecid (inhibidor de MRPs) inhibió dicha exclusión (35 y 85%
respectivamente) y al mismo tiempo causó un mayor incremento
del AMPci (20 y 59% respectivamente). El patrón cinético no se
modificó en presencia de MIX (inhibidor de fosfodiesterasas). Por
PCR en tiempo real se detectó la expresión de MRP4, MRP5 y
MRP8, y por western blot la expresión MRP4. Estos resultados
indican que los MRPs regulan los incrementos de AMPc en células
AR42J favoreciendo su salida, sugiriendo que la extrusión a través
de dichos transportadores puede ser un mecanismo adicional en
la regulación de los niveles de AMPc en este sistema, más aún
la alteración en la respuesta a ligandos clásicos asociados a incrementos
intracelulares de AMPc sugieren que el metabolismo
de dicho nucleótido se encuentra alterado en células tumorales
respecto de acinos pancreáticos normales.