INVESTIGADORES
DAVIO Carlos Alberto
congresos y reuniones científicas
Título:
MECANISMO MOLECULAR DE INTERNALIZACION
Autor/es:
ALONSO NATALIA; NOTCOVICH CINTIA; FERNADEZ NATALIA; DAVIO CARLOS; SHAYO CARINA
Lugar:
MAR DEL PLATA
Reunión:
Congreso; LV Reunión Científica Anual Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC), Reunión de la Sociedad Argentina de Fisiología y XLII Reunión de la Sociedad Argentina de Farmacología Experimental.; 2010
Institución organizadora:
SOCIEDAD ARGENTINA DE INVESTIGACIÓN CLINICA
Resumen:
Los receptores a histamina pertenecen a la familia de receptores
acoplados a proteína G (GPCRs). El receptor H1 (rH1) modula
la producción de IPs, mientras que el receptor H2 (rH2) regula los
niveles de AMPc. Estudios previos de nuestro laboratorio indican
que dichos receptores poseen la capacidad de cointernalizar ante
el estímulo con ligandos agonistas como parte de la regulación
cruzada que existe entre ellos. Dado que en otros sistemas ha
sido descripto que la internalización del rH1 es dependiente de
caveolina, mientras que la del rH2 es dependiente de clatrina,
el objetivo de este trabajo es evaluar el mecanismo de cointernalización
de los rH1 y rH2 en células CHO transfectadas con
ambos receptores (CHOH1-H2). Al evaluar mediante ensayos de
unión el número de sitios receptores de membrana luego de 1 h
de tratamiento con los agonistas específicos (2, 3-trifluormetilfenilhistamina
para el rH1 y amthamina para el rH2), observamos
que en este sistema la internalización del rH1 estimulada por
el agonista H1 es bloqueada en un 100% por filipin (inhibidor
de la endocitosis mediada por caveolina). Sorprendentemente
este inhibidor también bloqueo en un 95% la internalización del
rH2 estimulada por el agonista H1. Por otro lado, al evaluar la
internalización de los receptores en presencia de una construcción
dominante negativa de EPS15, proteína necesaria para la
internalización mediada por clatrina, observamos un bloqueo del
75% de la endocitosis del rH2 estimulada por el agonista H2 y
una inhibición del 100% en la cointernalización del rH1 inducida
por el mismo ligando. Por lo tanto estos resultados indican que
el mecanismo de cointernalización de los receptores H1 y H2 a
histamina en células CHOH1-H2, no depende del tipo de receptor
sino del estimulo aplicado, siendo dependiente de caveolina en
caso de ser inducida por agonistas H1 y dependiente de clatrina
en caso de ser inducida por agonistas H2.