Mecanismo de internalización y resensibilización del receptor H2 a histamina

NATALIA FERNANDEZ; FEDERICO MONCZOR; ALBERTO BALDI; CARLOS DAVIO; CARINA SHAYO

Mar del Plata

Congreso; L Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2005

SAIC

  En estudios previos mostramos la importancia del AMPc en la diferenciación de células U937, siendo la intensidad y duración de dicha respuesta factores determinantes en el proceso de diferenciación celular. En este sentido, hemos descripto que agonistas de receptores H2 a histamina si bien evocan una respuesta de AMPc no promueven la diferenciación de las células U937 debido a la rápida fosforilación del receptor mediada por miembros de la familia de quinasas de GPCRs. Es sabido que luego de ser fosforilado un GPCR puede ser internalizado y degradado o reciclado a la membrana celular. Dada la importancia de estos procesos como determinantes de la desensibilización/resensibilización de la respuesta evocada por un receptor, nos planteamos como objetivo estudiar el tráfico del rH2 luego del tratamiento con agonistas específicos. Mediante ensayos de unión y microscopía confocal realizados en células COS7 transfectadas con el rH2, observamos que a la hora de tratamiento con el agonista, el número de sitios H2 en membrana se redujo a la mitad y se recuperó en un 100% a la hora de retirado el estímulo. De la misma forma, la capaciadad de dar respuesta del rH2 se redujo en un 90% luego de 1 h de tratamiento con el agonista y se recuperó en un 50% a la hora de retirado el mismo. Al cotransfectar al rH2 con construcciones dominantes negativas para 2 proteínas clásicamente involucradas en la internalización de GPCRs (arrestina y dinamina) observamos que si bien el tratamiento con el agonista no conduce a una pérdida de sitios en membrana, la capacidad del receptor de dar señal se pierde y no se recupera aún retirado el estímulo. Estos resultados indican que la internalización del rH2 no es necesaria para la desensibilización del mismo y sí para la recuperación o reciclado de sitios activos en la membrana celular. Por otra parte, señalan la importancia de arrestina y dinamina en los procesos de endocitosis y reciclado del rH2.