Sinergismo entre alcaloides de Phlegmariurus saururus

ORTEGA M,; AGNESE A.M.; BALZARINI M; ACOSTA F; VALLEJO M

Buenos Aires

Jornada; VI Jornadas Nacionales de Plantas Aromáticas Nativas y sus Aceites Esenciales y II Jornadas Nacionales de Plantas Medicinales Nativas; 2018

Fac. de Farmacia y Bioquímica, UBA

Anteriormente, demostramos in vitro que tanto el extracto alcaloidal (EA) de Phlegmariurus saururus (Lam.) B. Øllg. [ex Huperzia saururus (Lam.) Trevis.] (Lycopodiaceae) como algunos de sus alcaloides poseen actividad inhibitoria de la enzima acetilcolinesterasa (AChE) (Ortega y col. 2004a). Sin embargo, el efecto observado para los alcaloides individuales es menor al que presenta el EA; esto sugirió un potencial sinergismo entre sus componentes. Nuestro objetivo ahora fue evaluar el efecto inhibitorio de AChE de combinaciones de sauroxina (Sx), 6-hidroxilycopodina (6OH), N-demetilsauroxina (NdSx) y huperzina A (HupA), comenzando con los que presentan menor actividad inhibitoria e incorporando los restantes conforme su capacidad inhibitoria. Se usó el método de Ellman adaptado para la medición en un lector ELISA, utilizando como control positivo salicilato de fisostigmina. Se empleó Acetil-tiocolina como sustrato y AChE, realizando las determinaciones a 405 nm. Se realizaron curvas de concentración-inhibición tanto de los alcaloides individuales como de sus combinaciones. Para el cálculo de las CI50 individuales, las de las combinaciones y del efecto obtenido (evaluado mediante el Índice de Combinación CI), se empleó el programa CompuSyn. Si CI>1, indica antagonismo; un CI=1 indica indiferencia, y CI1, lo que indicaría una acción antagonista. Con la incorporación de NdSx (6OH+Sx+NdSx) y posteriormente HupA (6OH+Sx+NdSx+HupA), se evidenció sinergismo a bajas concentraciones (CI=0,91 y CI=0,45 respectivamente). Asimismo, en estas últimas se observó antagonismo a altas concentraciones. Probablemente esto pueda deberse a que, según estudios de Docking y Dinámica Molecular previos, algunos alcaloides pueden compartir el mismo sitio activo (Puatti y col. 2013) y podrían competir entre ellos por unirse al sitio, según lo reportado para otros principios activos (Rodea-Palomares y col. 2010). Como conclusión, la adición de NdSx y HupA derivó en un sinergismo a bajas concentraciones. Esto sugiere que, a concentraciones más bajas que las ensayadas, se podría observar un sinergismo más marcado, a partir de esta hipótesis se podría explicar por qué el EA es más activo, ya que allí los alcaloides se encuentran en bajas concentraciones. Nuevos experimentos serán desarrollados para determinar qué comportamiento se da entre los alcaloides a concentraciones similares a las que se encuentran en el extracto.