HIDRÓLISIS DE NARINGINA CON ALFA-L-RAMNOSIDASA INMOVILIZADA EN ARCILLAS REGIONALES FERROMAGNETICAS

F. SORIA; M. CABRERA; A. MACORITTO; J. ROBIN; H. GERONAZZO

Salta -2009

Congreso; XVI Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2008

Asociación Argentina de Fisicoquímica y Química Inorgánica

Introducción. La naringina es el glicósido de flavonoide más abundante en pomelos, por hidrólisis enzimática se pueden obtener sus derivados: L-ramnosa y prunina, de uso en la industria alimenticia, farmacéutica y cosmética. El uso de enzimas inmovilizadas facilita su separación de productos y otros componentes presentes en la mezcla de reacción; como así también su reutilización. La separación puede optimizarse notablemente usando soportes magnéticos. Las arcillas como soportes, son materiales interesantes debido a su abundancia y bajo costo. Objetivos. Estudiar la obtención de L-ramnosa y prunina por hidrólisis de naringina con a-L-ramnosidasa inmovilizada covalentemente en arcilla ferromagnética. Caracterizar el soporte de acuerdo a los siguientes análisis: ATD-TG, FTIR, difracción de rayos X y SEM. Resultados. Se utilizo una a-ramnosidasa comercial (Tanabe) inmovilizada  en una arcilla del Valle de Lerma, Salta, Argentina [1]. La silanización del soporte se efectuó con aminopropiltrietoxisilano y la activación con glutaraldehído. La magnetización del soporte se obtuvo con una solución de Fe2+/Fe3+ a pH 11 y 95°C. Se trabajó con soluciones sobresaturadas de naringina (obtenida en nuestro laboratorio) al 6-8%, a pH 4-4,8 y 60 ºC. El registro del curso de la reacción fue determinado por HPLC en un equipo Shimadzu LC-4 con una columna C18 y un detector UV (280nm). Para los ensayos de actividad de la enzima libre e inmovilizada se utilizo un sustrato cromogénico (p-nitrofenil a-ramnósido). A las tres horas la conversión de naringina fue del  80% para una solución de naringina al 6% y pH 4,8 y del 77 % para una solución de naringina al 8% y pH 4. A las cinco horas se lograron conversiones del 85% y del 86 % respectivamente. El derivado inmovilizado mantuvo su actividad después de las hidrólisis a 60°C. Si bien la conversión con la enzima libre en iguales condiciones es mayor (11%), su actividad residual decae a un 80% [2]. Conclusiones Se concluye que soluciones sobresaturadas de naringina puede ser hidrolizadas utilizando α- ramnosidasa inmovilizada en arcilla bruta regional magnetizada. El derivado inmovilizado ferromagnético mantuvo su actividad durante el proceso, lo cual posibilita su reutilización a bajo costo.