Bacterias aisladas del suelo como potenciales agentes de biocontrol aplicadas sobre semillas de poroto

SABATE, DANIELA CONSTANZA; PÉREZ BRANDAN, CAROLINA; ALVAREZ, DAVID; AUDISIO, CARINA

San Salvador de Jujuy-Jujuy

Otro; X REBIOS-II CONBIOMOS.X REUNION NACIONAL CIENTIFICO-TECNICA DE BIOLOGIA DEL SUELO Y FIJACION BIOLOGICA DE NITROGENO II CONGRESO NACIONAL DE BIOLOGIA MOLECULAR DE SUELOS; 2015

El cultivo de poroto (Phaseolus vulgaris L), en sus diversas variedades, es uno de los más típicos y de mayor importancia en el noroeste argentino (NOA). El principal productor es la provincia de Salta, abarcando el 80% de la producción total (1). Existen enfermedades causadas por patógenos de plantas que afectan este cultivo y ocasionan importantes pérdidas económicas. El uso de microorganismos benéficos se considera uno de los métodos más prometedores para realizar un manejo del cultivo más racional, seguro y ecológicamente compatible con el ambiente (2).El objetivo de este trabajo fue aislar y analizar cepas de Pseudomonas, procedentes de suelo, como agentes de biocontrol sobre el estado sanitario en semillas de poroto.Para realizar el aislamiento de cepas pertenecientes al género Pseudomonas, se tomaron muestras de suelos agrícolas, del centro-este de la provincia de salta cultivados bajo diferentes sistemas productivos y suelos prístinos, sin disturbar (cortinas). Las muestras se tomaron de suelo cercano a la raíz a 10 cm de profundidad y fueron muestras simples. Se realizaron diluciones seriadas, que fueron inoculadas en medio Pseudomonas agar F. Las placas se incubaron en aerobiosis a 35-37 ºC durante 24-48 horas. Se recuperaron aquellas cepas que a simple vista y bajo observación microscópica presentaron morfología característica de dicho género bacteriano. Para la preselección de las cepas, se realizaron pruebas de antagonismo por el método del cultivo dual frente a diversos patógenos de plantas, y se calculó el grado de inhibición fúngica (%IR) después de 7 días de contacto (3). En las cepas preseleccionadas se analizó su efecto como agentes de biocontrol sobre el estado sanitario en semillas de poroto blanco cv. Alubia y poroto negro cv. Nag 12. Para ello, las semillas de cada variedad fueron desinfectadas y luego sumergidas en el cultivo de la cepa de Pseudomonas sp. bajo estudio. Como controles se utilizaron semillas desinfectadas sin inocular con las cepas aisladas. Luego, las semillas fueron colocadas en cajas de petri (5 semillas por placa) que contenían el medio agar papa glucosado (APG), e incubadas durante 5-7 días a 28-30ºC. Transcurrido dicho período se analizó el estado sanitario de las semillas. Los ensayos se realizaron por triplicado, por lo que se analizaron 15 semillas por tratamiento.A partir de los ensayos realizados como se mencionó anteriormente, se aislaron 53 cepas de Pseudomonas spp. por la morfología macro y microscópica observada. Cuando se analizo la actividad antagónica de estas cepas, 6 de ellas fueron preseleccionadas debido a que presentaron mayor efecto antagónico frente a distintos hongos patógenos de suelos: P6, P12, P17, P22, P25 y P32. Las cepas P12, P22 y P32, presentaron la mayor actividad antifúngica frente a los fitopatógenos evaluados los cuales presentaron un % de IF en un rango del 50%, mientras que el %IF de P6, P17 y P25 varío entre 38 y 45 %. Cuando se analizo el estado sanitario de las semillas de poroto blanco cv. Alubia, se observó en las semillas controles (sin inocular), el crecimiento de bacterias y hongos patógenos y contaminantes como Fusarium spp., Penicillium spp., Rhizopus spp., y Cladosporium spp.. Cuando las semillas fueron tratadas con P6, P12, P17 y P32, no se observó el crecimiento de hongos, mientras que en las semillas tratadas con P22 y P25 se observó el desarrollo de Cladosporium spp. solo en 1 de las 15 semillas para ambos tratamientos. Además, solo en las semillas tratadas con P6 se registró el crecimiento de bacterias contaminantes sobre 4 de las 15 semillas tratadas, mientras que no se observó el crecimiento de bacterias contaminantes en ninguno de los demás tratamientos. Por otra parte, cuando se analizó el efecto de las diferentes cepas de Pseudomonas sobre las semillas de poroto negro cv. Nag 12, se determinó que en las semillas controles (sin inocular) crecieron bacterias y hongos patógenos como Fusarium spp., Cladosporium spp. y Alternaria spp. Pero cuando las semillas fueron tratadas con P6, P12, P22 y P32, no se observó el crecimiento de bacterias ni hongos contaminantes, mientras que en las semillas tratadas con P17 se desarrolló Fusarium spp. en solo 1 de las 15 semillas tratadas. Además, cuando se evaluó el efecto de la cepa P25, se observó el crecimiento de Cladosporium spp. en solo 1 de las 15 semillas analizadas.En conclusión, estos resultados indican que las 6 cepas de Pseudomonas preseleccionadas presentan propiedades antagónicas frente a diferentes bacterias y hongos patógenos y contaminantes de semillas. Las cepas P12 y P32 tuvieron la capacidad de suprimir el desarrollo de todas las bacterias y hongos fitopatógenos y contaminantes presentes en las semillas de poroto blanco cv. Alubia y poroto negro cv. Nag 12, utilizados en este ensayo, mientras que las cepas P6, P17, P22 y P25, tuvieron efecto antagónico frente a la mayoría de las bacterias y hongos patógenos presentes en las semillas de poroto.Por ello, posteriores estudios son necesarios para la aplicación de estas bacterias como potenciales agentes de biocontrol en semillas de poroto.