Microbiota endosimbionte de Apis mellifera como indicador de sanidad apícola

DI GERÓNIMO VANESA; PORRINI, MARTÍN P.; GENDE, LIESEL B.; DI MEGLIO LEONARDO; DAMIANI NATALIA; MARCANGELI J.A; QUINTANA, SILVINA; MAGGI M

Mar del Plata

Workshop; 1° Workshop Latinoamericano en Sanidad Apícola; 2018

CIAS

La microbiota presente en el intestino de los insectos cumple funciones en el individuo, como a nivel ecológico y evolutivo. El objetivo del presente trabajo consistió en aislar e identificar los microorganismos predominantes en el intestino medio de Apis mellifera, a fin de estudiar posibles modificaciones en presencia de patógenos frecuentes (Paenibacillus larvae, Nosema ceranae y Varroa destructor). Se trabajó con colonias sanas y afectadas por cada una de las patologías, trabajando con cinco abejas por cada grupo. Para analizar el grado de infección o infestación se analizó la prevalencia de varroa, se realizaron conteos de esporas de Nosema spp. y cuantificación de esporas de P. larvae mediante siembra microbiológica. Para aislar los microorganismos predominantes en el intestino medio de A. mellifera, homogenatos de dicha sección intestinal fueron sembrados en medios de cultivo específicos para bacterias y hongos. A partir de las colonias aisladas se identificaron representantes bacterianos afiliados con los géneros Citrobacter, Enterobacter y Staphylococcus, y hongos afiliados a los géneros Candida, Cladosporium y Hanseniaspora por medio de amplificación por PCR en tiempo real correspondientes a un fragmento del gen codificante para el ARNr 16s (bacterias) y para los espacios intergénicos ribosomales (hongos), análisis por High Resolution Melting (HMR) y posterior secuenciación. La implementación de la técnica de HRM como método de identificación resultó eficiente. Adicionalmente, a partir del homogenato sembrado en diferentes medios de cultivo, se realizaron recuentos en placa para evaluar cuali y cuantitativa la posible variación entre la microbiota de abejas de colonias sanas y de colonias infectadas con P. larvae, N. ceranae o infestadas con V. destructor, separadamente. Se llevaron a cabo análisis estadísticos multivariados. No se observaron variaciones significativas en la microbiota asociada de abejas provenientes de colonias sanas y enfermas. Para inferir un posible efecto de los mencionados patógenos sobre la microbiota, se prevee aumentar el número de abejas analizadas.