La Sobreexpresión del dominio de unión a carbohidratos de la expansina2 de frutilla (CBMFAExp2) en A. thaliana altera el crecimiento y el metabolismo de la pared celular.

NARDI, C; VILLARREAL NM; MARTÍNEZ GA; CIVELLO PM

Mar del Plata

Congreso; XXIX Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2012

Sociedad Argentina de Fisiología Vegetal

Las expansinas son proteínas no hidrolíticas que participan en el desensamblaje de la pared celular. Su estructura incluye tres dominios: un péptido señal en el N-terminal que dirige la proteína a la vía secretora; un dominio central perteneciente a la familia de las glicosyl hidrolasas y un dominio de unión a carbohidratos (CBM) en el C-terminal. Este último se uniría a los polímeros de pared, mientras el dominio N-terminal llevaría a cabo su acción. En el presente trabajo, se dirigió la expresión del CBM de la expansina2 de frutilla (CBMFaEXP2) a la pared celular de A. thaliana. La hipótesis de trabajo propone que la sobreexpresión de un CBM en la pared bloquearía los sitios de unión de otras enzimas de degradación, interfiriendo en su actividad. En primer lugar, se realizaron ensayos de “binding” para determinar posibles blancos de unión para CBMFaEXP2 y se observó que era capaz de unirse in vitro a pectinas y hemicelulosas además de celulosa. Además, se transformaron plantas de A. thaliana con CBMFaEXP2. Se obtuvieron tres líneas homocigotas y se comparó el fenotipo de estas con plantas tipo salvaje (wt). Las plantas transgénicas fueron más altas que las wt, debido a que la tasa de crecimiento de la vara floral fue mayor para las líneas transgénicas. Por otro lado, estas líneas presentaron una floración más temprana y raíces más cortas  en comparación con las wt. Se observó además que las semillas de las plantas transgénicas tenían un mayor diámetro. Por último, se midió el grosor de la pared celular y se observó que las mismas eran más gruesas en plantas transgénicas en comparación con plantas wt. Esto fue debido a un mayor contenido de pectinas. Se concluye que la sobreexpresión de CBMFaEXP2 en la pared celular es capaz de alterar el crecimiento normal de las plantas y el metabolismo de la pared celular, principalmente el de pectinas.