DETERMINACIÓN CUANTITATIVA DE PUREZA POLIMÓRFICA DE RIFAMPICINA EN COMPRIMIDOS DE TRIPLE ASOCIACIÓN MEDIANTE ESPECTROSCOPIA NIR/QUIMIOMETRIA

MAGGIO, RUBÉN M.; ANTONIO, MARINA; RAFFAGHELLI, MARIANO

Buenos Aires

Congreso; XIV Jornadas de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2019

Sociedad Argentina de Farmacia y Bioquimica Industrial (SAFyBi)

IntroducciónEn la industria farmacéutica, la aplicación de técnicas para la identificación, caracterización y cuantificación de los polimorfos de un ingrediente farmacéutico activo (IFA) es esencial en todas las etapas del proceso de manufactura, dado a que cambios en la forma polimórfica conducen potencialmente a modificaciones en la eficacia y seguridad del producto formulado. Por lo tanto, resulta imperioso tener una comprensión cuidadosa y exhaustiva del estado polimórfico del IFA durante toda la vida útil del medicamento.La Rifampicina (RIF) es un antibiótico macrocíclico empleado en el tratamiento de primera línea de la tuberculosis. Junto con Isoniazida (ISH), Pirazinamida (PZA) y Etambutol (ETB), conforman el núcleo central del tratamiento. Estos medicamentos son efectivos en la mayoría de los casos y se pueden encontrar individualmente o como asociaciones en una sola preparación farmacéutica, conocidas como productos de combinación de dosis fija (FDC).RIF presenta dos formas cristalinas anhidras (Forma I y Forma II), amorfos y varios solvatos. Sin embargo, la Forma II es la única apta para la formulación de comprimidos.ObjetivoDesarrollar una metodología analítica basada en PLS (regresión por mínimo cuadrados parciales), a partir de los datos espectrales del espectro infrarrojo cercano (NIR) para cuantificar el contenido polimórfico de RIF (pureza polimórfica) en comprimidos comerciales de triple asociación (RIF/ISH/PZA).Materiales y métodosSe utilizaron lotes comerciales de las Formas I y II, los cuales fueron caracterizados mediante calorimetría diferencial de barrido (DSC), determinación de punto de fusión, espectroscopías en el infrarrojo medio (MIR) y cercano (NIR).Seguidamente, se prepararon conjuntos de entrenamiento (n= 16) y validación (n=8) conteniendo mezclas polimórficas (Forma I/ Forma II) y matriz de excipientes en distintas proporciones preestablecidas. Fueron preparadas mediante pesada y homogenización por mezcla mecánica. Por otra parte, se seleccionaron aleatoriamente diez comprimidos, se les retiró la cubierta y los núcleos fueron suavemente reducidos a polvo para evitar conversiones polimórficas, homogeneizando el tamaño de partícula por tamizado. Una fracción de estas muestras se enriqueció con la proporción correspondiente de Forma I y matriz de excipientes para obtener niveles de Forma II de 0.500 y 0.800 p/p.Se obtuvieron espectros NIR por triplicado en el intervalo 400-2500 nm que luego fueron dispuestos matricialmente y analizados mediante el algoritmo PLS. Resultados y discusiónLas condiciones óptimas de calibración se obtuvieron mediante la evaluación del mínimo PRESS (suma de cuadrados del error de predicción) durante el procedimiento de validación cruzada (validación interna). Para mejorar las características espectrales y reducir las fuentes de variación no deseadas, se aplicó como pretratamiento la derivada y se emplearon cuatro factores PLS, utilizando un rango espectral acotado (1000-2500 nm).La exactitud y precisión del modelo fueros evaluadas mediante comparación de los valores reales contra los predichos por PLS durante la calibración y la validación para la pureza polimórfica de la Forma II (validación externa, prueba t). La recuperación promedio del conjunto de validación (102.8%) no fue estadísticamente diferente al 100% [Tcal = 1.17, Ttabla (0.99; Df = 11) = 7.65]; y la desviación estándar relativa (RSD, 3,7%) fue inferior al 5%.Al analizar las muestras de comprimidos comerciales, el valor estimado de la Forma II fue de 0.800 p/p con respecto al valor real de 1.00 p/p. Este resultado se corroboró al aplicar el modelo validado para analizar el contenido polimórfico de muestras comerciales enriquecidas. Los valores obtenidos fueron 0.378 ± 0.011 p/p y 0.631 ± 0.005 p/p para los niveles de 0.500 y 0.800 p / p de la Forma II, respectivamente.ConclusiónEl método desarrollado demostró ser idóneo mediante procedimientos de validación interna y externa, realizando mediciones exactas y precisas. Además, permitió determinar que el contenido de la Forma II era del 80% con respecto al valor real (100%). Este resultado se corroboró al analizar las muestras enriquecidas, cuyos valores obtenidos (37.8 ± 1.1% y 63.1 ± 0.5%, para los niveles 50 y 80% de la Forma II, respectivamente) mostraron una correlación con el valor mencionado anteriormente.El modelo NIR-PLS propuesto brinda soluciones a situaciones reales y puede usarse con éxito como una herramienta para el control de calidad de rutina en la industria farmacéutica.