Análisis comparativo de Baeyer-Villiger monooxigenasas rizobianas

RIAL, DANIELA V.; RIAL, DANIELA V.; CECCOLI, ROMINA D.; CECCOLI, ROMINA D.; BIANCHI DARIO A; BIANCHI DARIO A

San Luis

Simposio; III Simposio Latinoamericano de Biocatálisis y Biotransformaciones - VIII Encuentro Regional de Biocatálisis y Biotransformaciones; 2018

SAByB y colaboradores

Las Baeyer-Villiger monooxigenasas (BVMOs) son flavoenzimas que presentan un gran interés en los ámbitos académico e industrial por sus propiedades y potenciales aplicaciones 1-3. Estas enzimas permiten obtener ésteres o lactonas de forma selectiva, eficiente y ambientalmente amigable mediante la biooxidación de cetonas lineales o cíclicas, respectivamente, como se muestra en la Figura. El objetivo de nuestro trabajo es identificar y caracterizar BVMOs con el fin de generar nuevos biocatalizadores para aplicaciones en síntesis química. Nuestro grupo ha identificado, por homología de secuencias, seis genes como posibles candidatos para BVMOs tipo I en el genoma de la bacteria Bradyrhizobium diazoefficiens. A partir de análisis filogenéticos hemos observado que estas BVMOs se localizan en cuatro grupos divergentes de BVMOs recombinantes previamente caracterizadas. Las seis secuencias fueron clonadas y expresadas en Escherichia coli. Tres BVMOs fueron obtenidas mayoritariamente en forma soluble, lo cual nos permitió evaluar su perfil de aceptación de sustratos mediante ensayos de biotransformación en células enteras frente a cetonas lineales, aromáticas, cíclicas y bicíclicas. En este trabajo presentamos el análisis comparativo de los perfiles de sustratos de los biocatalizadores desarrollados. Además, hemos estudiado el curso de la reacción de cada BVMO frente a la cetona modelo (±)-cis-biciclo[3.2.0]hept-2-en-6-ona y determinado sus regio- y enantioselectividades particulares. Referencias:1. Leisch, H.; Morley, K.; Lau, P.C. Chem. Rev. 2011, 111, 4165-4222.2. Ceccoli, R. D.; Bianchi, D. A.; Rial, D. V. Front. Microbiol. 2014, 5, 25.3. Rudroff, F.; Bianchi, D. A.; Moran-Ramallal, R.; Iqbal, N.; Dreier, D.; Mihovilovic, M.D. Tetrahedron 2016, 72, 7212-7221.Agradecimientos: PIP 11220150100934CO, CONICET, Argentina; BIO451, UNR, Argentina; BIO506, UNR, Argentina. Los autores son miembros de la Carrera del Investigador Científico y Tecnológico de CONICET, Argentina.