Análisis multivariado de datos cromatográfico-espectroscópicos de segundo orden. Aplicación a la determinación de la composición enantiomérica de agroquímicos quirales

PADRÓ, J. M.; DI LORETO, H.; OLIVIERI, A.C.; CASTELLS, C.

La Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica; 2015

AAQA

El desarrollo de métodos analíticos para la separación y posterior análisis de composición enantiomérica en mezclas racémicas mediante HPLC quiral es usualmente largo, tedioso y costoso. Al no poder predecirse completamente la enantioresolución en las distintas fases existentes para la separación directa de una mezcla racémica en sus enantiómeros, resulta necesario probar varias condiciones cromatográficas, distintos tipos de columnas y fases móviles, tanto en condición normal como inversa, con el fin de encontrar la mejor separación posible. A pesar de todo este esfuerzo en ocasiones solo puede hallarse una completa resolución de los perfiles cromatográficos en condiciones que ocasionan muy largos tiempos de análisis. Además, cuando se requiere determinar pureza enantiomérica, normalmente uno de los componentes de la mezcla racémica se encuentra a niveles usualmente menores al 1%, lo que requiere inyectar una gran concentración del componente mayoritario, ocasionando ensanchamiento de la banda cromatográfica, la cual puede solapar el pico minoritario si la resolución debida a la selectividad no es lo suficientemente grande. Todo lo anterior puede complicarse aún más si otro componente de la mezcla coeluye con los analitos de interés. Afortunadamente cuando se obtienen datos de segundo orden, como los obtenidos al utilizar en HPLC un detector con arreglo de diodos (DAD), el uso de herramientas quimiométricas como los cuadrados mínimos parciales desdoblados (Unfolded Partial Least Square ? U-PLS) permite obtener datos de calidad cuantitativa a partir de perfiles superpuestos aún en presencia de interferentes. Recientemente se utilizó el método multivariado U-PLS para obtener resultados cuantitativos de perfiles cromatográficos parcialmente solapadas de fármacos de la familia de los profenos en tabletas comerciales [1,2].En este trabajo se implementaron herramientas quimiométricas a perfiles cromatográficos de mezclas racémicas parcialmente separadas de pesticidas comúnmente utilizados para el control de la aparición de malezas y plagas, específicamente RS-fenoxaprop-p-ethyl y RS-lactofen con una columna quiral de permetil-β-ciclodextrina en fase reversa. Usando U-PLS, los perfiles de enantiómeros fuertemente solapados en el cromatograma pudieron procesarse con éxito, con un error de predicción relativa inferior a ±6%, sin requerir enantioresolución a línea base entre picos, incluso en condiciones cromatográficas desfavorables, es decir, cuando la señal estaba casi completamente superpuesta. Los resultados serán validados usando calibración univariada de perfiles completamente resueltos y el método propuesto será aplicado a la determinación de pureza enantiomérica en formulaciones comerciales.