“Resistencia de hepatocitos aislados de higados preneoplasicos de ratas ante el acido etacrinico (ea). rol del sistema de defensa gst/gsh.”

PARODY J; ALVAREZ M; QUIROGA A; RONCO T; FRANCÉS D; MONTI J; OCHOA E; CARNOVALE C; CARRILLO M

Buenos Aires

Jornada; XXII Jornadas de Oncología "Un enfoque multidisciplinario"; 2006

Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"

Las glutation S-transferasas (GSTs) participan en la destoxificación de xenobióticos, incluyendo drogas empleadas en terapias anticancer. Estas enzimas catalizan la conjugación de sustancias electrofílicas con GSH, favoreciendo su excreción. El EA es una droga que causa hepatotoxicidad debido a su metabolismo oxidativo. EA y EA-SG, son inhibidores de las GSTs. Por otra parte, ratas sometidas a un modelo biestadio de carcinogénesis química (iniciación-promoción, IP) presentan inducción de la isoenzima GST-P en hígado, ausente en ratas control (C). El objetivo del presente trabajo fue analizar el rol del sistema GST/GSH en hepatocitos IP ante el EA. Para ello, se obtuvieron hepatocitos aislados de ratas y se incubaron durante distintos tiempos (30, 60 y 120 min): a) en ausencia de EA y b) con distintas concentraciones de EA (0,1; 0,5 y 1,0 mM). Se observó una disminución significativa de la viabilidad en hepatocitos C tanto a los 60 min (sin EA=78±1%; 0,5 mM EA=65±4%*; 1,0 mM EA=60±3%*) como a los 120 min (sin EA=56±3%; 0,5 mM EA=37±4%*; 1,0 mM EA=30,1%*). Sin embargo, la viabilidad en hepatocitos IP sólo disminuyó a los 120 min y con 1,0 mM de EA (sin EA=72±1%; 1,0 mM EA=29±17%*)(* p<0,05). Asimismo, la liberación de LDH y GPT al medio de cultivo ante la injuria producida por el EA fue menor en hepatocitos IP que en C. Mediante Western blotting se vio una inducción de la isoenzima GST-P en animales IP, la cual no se encontró en animales C. También se observó una disminución significativa de las isoenzimas alfa y mu en hepatocitos IP. Los niveles iniciales de GSH intracelulares en hepatocitos IP fueron significativamente más elevados que los de los C. Además,.su concentración mostró una disminución acelerada ante concentraciones crecientes de EA. En conclusión, los mayores niveles de GSH, la isoenzima GST-P presente en los hepatocitos IP y su capacidad de catalizar la conjugación de EA con GSH, serían factores responsables de conferir un mecanismo de resistencia ante la presencia de este tóxico