La citometría de flujo es una técnica de gran potencial analítico, que permite medir diversos parámetros en decenas de millares de células individuales en pocos segundos. El citómetro de flujo es el equipo que mide las propiedades de absorción y dispersión de luz por la célula o partícula subcelular, y fluorescencia emitida por fluorocromos unidos a componentes celulares de interés, inducidas por una iluminación apropiada.

Mediante este estudio se puede analizar poblaciones de células, a través de la medición de la dispersión de la luz y la fluorescencia emitida por partículas en una mezcla compleja, suspendidas en un medio líquido y para una máxima eficiencia.

La técnica empleada es la citometría de flujo, de alto potencial analítico y contempla los siguientes pasos: * Encendido del citómetro y calentamiento de los lásers. * Calibrado del equipo usando BD CST (Cytometer Setup and Tracking) beads. * Adquisición de la muestra. Se puede adquirir hasta 9 parámetros simultáneamente (dispersión frontal, dispersión lateral y 7 colores). La adquisición es digital a una velocidad de hasta 100.000 eventos por segundo. * Los datos obtenidos se entregan en un CD o se pueden imprimir como PDF. * Lavado del equipo con alcohol, BD FACs clean y agua.

Citómetro de flujo Becton Dickinson 643177

Bioquímica y Biología Molecular

BIOLOGIA-BIOQUIMICA

Ciencia y cultura-Ciencia y tecnologia

Ensayos y análisis técnicos

Citometría
Cell Sorting
Análisis población de células

La citometría de flujo es una técnica con gran potencial analítico para medir diversos parámetros en decenas de millares de células individuales en pocos segundos. La separación celular por citometría de flujo o "Cell Sorting" permite el aislamiento físico de subpoblaciones celulares de interés.

La separación celular por citometría de flujo o "cell sorting" es el proceso de separación física de poblaciones celulares que se diferencian en uno o varios parámetros que son analizables por citometría de flujo. Esta separación (sorting) puede llevarse a cabo en condiciones asépticas. El citómetro permite separar hasta 4 poblaciones celulares.

La técnica empleada es la citometría de flujo y contempla los siguientes pasos: * Encendido del citómetro y calentamiento de los lásers * Calibración del equipo usando BD CST (Cytometer Setup and Tracking) beads * Determinación del drop delay usando Accudrop beads * Separación celular * Adquisición muestra post-sort * Lavado del equipo con alcohol, BD FACs clean y agua

Citómetro de flujo Becton Dickinson 643177

Bioquímica y Biología Molecular

BIOLOGIA-BIOQUIMICA

Ciencia y cultura-Ciencia y tecnologia

Ensayos y análisis técnicos

Citometría
Cell Sorting
Separación de poblaciones celulares

El servicio propone evaluar distintos parámetros que permiten predecir el comportamiento de las células tumorales expuestas a un compuesto en particular, tanto en cuanto a sus propiedades proliferativas como invasivas.

Las determinaciones se realizan usando células derivadas de tumores sólídos (e.g. HepG2/C3A, SK-Hep1, Huh7, etc.) y células derivadas de tumores líquidos (e.g. THP1, YTS, KT86), dependiendo del interés del usuario y de la prestación requerida. Los costos son estimados por cada línea celular usada. La determinación de crecimiento celular se hace por análisis de la actividad metabólica mitoncondrial (ensayo de MTT); el análisis de ciclo celular mediante la evaluación del contenido de DNA teñido con ioduro de propidio por citometría de flujo y la determinación de muerte celular total y apoptótica mediante la evaluación de la incorporación de ioduro de propidio y la exteriorización de fosfatidil serina, respectivamente, por citometría de flujo. El estudio de la capacidad de formación de colonias por medio de una matriz de agar. La evaluación de las propiedades invasivas de las células se obtiene por ensayos de migración a través de filtros (migración transwells)

Citómetro de flujo BD Biosciences BD FACS AriaII

Ciencias Médicas

MEDICINA-FISIOLOGIA

Salud humana

Fabricación de medicamentos de uso humano y productos farmacéuticos

Cancer
Antitumoral
Proliferación
Muerte celular
Invasión

El servicio propone evaluar la presencia de las especies de micoplasma que se presentan generalmente como contaminantes de los cultivos celulares mediante la detección temprana de la presencia del ADN proveniente de los mismos en los cultivos celulares por la técnica de PCR.

Se determina la presencia del ARN ribosomal (16S rRNA) utilizando primers que reconocen las secuencias de los ARN conservadas en las especies de micoplasmas detectadas más frecuentemente como contaminantes de los cultivos celulares, incluyendo especies asociadas a contaminación originada en el operador (M. hominis, M. orale y M. salivarium), o provenientes de suplementos de cultivo, como el suero fetal bovino y la tripsina (M. arginini y M. hyorhinis). La técnica tiene alta sensibilidad y especificidad, determinando la presencia de los micoplasmas mencionados en niveles inferiores a los detectables por tinción nuclear.

Termociclador Perkin Elmer PCR System

Ciencias Médicas

MEDICINA

Salud humana

Investigación y desarrollo experimental en el campo de las ciencias médicas

16S rRNA
Cultivo celular
Micoplasmas
PCR
Contaminación

La ultracentrifugación sirve para separar componentes de sistemas biológicos con diferentes coeficientes de sedimentación. El servicio comprende el asesoramiento sobre el uso de la ultracentrífuga, provisión de los tubos apropiados y lubricantes para los rotores, y el mantenimiento del equipo en función del tiempo de utilización.

La centrifugación es una técnica de sedimentación, acelerada gracias al uso de fuerza centrífuga. Se aplica al análisis o a la separación de mezclas de partículas, células, orgánulos o moléculas. Según el medio en el que se centrifuga y la forma como se aplica la muestra: - Centrifugación diferencial: El comportamiento de cada componente de la muestra depende de su forma, tamaño, densidad y de las condiciones de centrifugación. Se obtienen sólo 2 fracciones: sedimento y sobrenadante. Una aplicación típica es el fraccionamiento subcelular. - Centrifugación zonal o de velocidad de sedimentación: La muestra se aplica en una capa delgada sobre el medio de centrifugación, que es un gradiente de densidad. Bajo la fuerza centrífuga, las partículas sedimentan a través del gradiente concentrándose en zonas o bandas discretas. Su velocidad de avance (y, por tanto, el mecanismo de la separación) depende de su tamaño, forma y densidad; todos estos parámetros se combinan en el coeficiente de sedimentación, El gradiente de densidad se crea mediante un gradiente de concentración: concentraciones crecientes, al bajar en el tubo, de un componente adecuado. Se usan para ello sacarosa, cloruro de cesio, albúmina, suero fetal bovino o medios comerciales como Ficoll, Percoll, etc. - Centrifugación isopícnica o de equilibrio de sedimentación: Se utiliza también un gradiente de densidad, pero en este caso el tiempo de centrifugación es lo suficientemente largo como para que se alcance el equilibrio de sedimentación (entre la fuerza centrífuga, el empuje hidrostático de la célula y su difusión). Para conseguirlo, se usan gradientes continuos que cubren todo el intervalo de densidades de los componentes de la muestra: en el fondo del tubo la densidad del medio ha de ser mayor que la del componente más denso.

Bioquímica y Biología Molecular

BIOLOGIA-BIOQUIMICA

Salud humana

Fabricación de medicamentos de uso humano y productos farmacéuticos

ultracentrifugación
centrifugación diferencial
fraccionamiento subcelular
purificación de proteínas recombinantes
aislamiento de microdominios lipídicos

PCR en tiempo real (en inglés real time PCR) es una variante de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) utilizada para amplificar y simultáneamente cuantificar de forma absoluta el producto de la amplificación de ácido desoxirribonucleico (ADN). El servicio comprende el asesoramiento y uso del termociclador en función del tiempo de utilización para el análisis de una determinada muestra.

El equipo se pone a disposición para el análisis de muestras. Además, se brindará asesoramiento sobre el manejo del software (MXPRO) que dirige las operaciones del equipo, y sobre el análisis e interpretación de los resultados. Este equipo incluye un bloque de 96 pocillos para tubos de 0,2 ml con tapa en domo o bien, tiras de 8 tubos o placas de 96 pocillos. Los equipos cuentan con una potente lámpara de luz blanca, como fuente de excitación y un sensible fotomutiplicador de 16 bits para la detección de emisión, logrando un rango dinámico de 10 unidades logarítmicas y capacidad de detección de una sola copia de DNA. Los datos adquiridos por tan sensibles sistemas, son analizados por el software MXPro, que cuenta con funciones de cuantificación absoluta y relativa según reglamento MIQE, además, incluye una función de discriminación alélica y SNPs por sondas diagnósticas y una función de lectura fluorométrica para cuantificar DNA o RNA total. El software además cuenta con una función de experimentos múltiples, que le permite asociar distintas corridas dentro de un solo experimento

Bioquímica y Biología Molecular

QUIMICA-FARMACEUTICA

Qca.,Petroqca.y Carboqca.-Ind.Farmaceutica

Fabricación de medicamentos de uso humano y productos farmacéuticos

Cuantificación de fragmentos de ADN
Análisis de expresión génica diferencial
Genotipificación
Diagnóstico molecular

Asesoramiento en la puesta a punto de procedimientos quirúrgicos, técnicas histológicas, bioquímicas y de biología molecular para el estudio de patologías hepáticas experimentales en ratones.

- Asesoramiento en la puesta a punto de procedimiento quirúrgico de hepatectomía parcial y de diversos modelos de hepatocarcinogénesis en ratones. - Asesoramiento en estudios bioquímicos. - Asesoramiento en estudios histológicos e inmunohistoquímicos. - Asesoramiento en técnicas de biología molecular de rutina (técnicas de western blot y qRT-PCR).

Ciencias Médicas

MEDICINA-FISIOLOGIA

Enfermedades no endemicas

Ensayos y análisis técnicos

regeneración hepática
proliferación celular
ciclo celular
vías de señalización
hepatocarcinogénesis

Revisión ética de protocolos de estudio clínico presentados por la Industria Farmacéutica con el fin de asegurar que el paciente participante sea libre para dar su consentimiento y que este consentimiento contenga toda la información sobre los riesgos y beneficios a los que será sometido el paciente, respetando su libertad de abandonar el protocolo y todos las normas éticas establecidas por ANMAT y las distintas convenciones internacionales.

Revisión de los protocolos y formularios de consentimiento informado así como todo material que recibirán los pacientes para evaluar si son éticamente correctos, comprensibles por los pacientes y estos son libres para consentir en participar de los protocolos.

Ciencias Médicas

MEDICINA

Salud humana

Fabricación de productos farmaceúticos, sustancias químicas medicinales y productos botánicos de uso farmaceútico

Consentimiento Informado
Bioetica
Protocolo de Investigación clínica

Incluye siembra, mantenimiento y transferencia de material genético al interior celular en salas de cultivo de IFISE; estudio de citotoxicidad realizados mediante ensayo de MTT. Se cosechan las células, se obtienen lisados y se cuantifica las proteínas totales para analizar posteriormente la expresión de la/s proteínas de interés por western blot. Además se extrae el ARN de las células y se procesa para la cuantificación de/los genes de interés por PCR en tiempo real.

El servicio está enfocado a responder demandas de empresas del sector farma y/o alimenticias principalmente. Para los procedimientos de iembra, mantenimiento y transferencia de material genético al interior celular se utilizan las salas de cultivo que se encuentran en IFISE. Los estudios de citotoxicidad se realizan mediante ensayo de MTT. Se cosechan las células, se obtienen lisados y se cuantifican las proteínas totales para analizar posteriormente la expresión de la/s proteínas de interés por western blot. Además se extrae el ARN de las células y se procesará para la cuantificación de/los genes de interés por PCR en tiempo real. Se entrega un informe con los resultados obtenidos de cada procedimiento, de acuerdo a lo que cada interesado requiera.

Incubador CO2 Sanyo MCo 17AC | Cabina de seguridad BD Biosciences 1386

Biología

BIOLOGIA-CELULAR Y MOLECULAR

Salud humana

Investigación y desarrollo experimental en el campo de la ingeniería y de las ciencias exactas y naturales

ensayos de citotoxicidad
Cultivo celular
Transfección de material genético
PCR en Tiempo Real
Western blot

Visualización de muestras fluorescentes, ya sea porque poseen autofluorescencia o porque se encuentran marcadas con una molécula fluorescente como un anticuerpo. En ambos casos las muestras pueden ser cortes histológicos, cultivos celulares montados sobre portaobjetos en medio de cultivo, pequeñas muestras enteras como por ejemplo: hojas, embriones etc. Destinado a laboratorios, universidades y/o empresas.

1- Por fluorescencia: Se excita 1 muestra con luz filtrada proviene de una fuente (lámpara de descarga de vapor de mercurio gaseoso). 2- Por campo claro: la luz que emite la fuente de iluminación es ópticamente conjugada con en el plano de la muestra a través las lentes del colector y el condensador.

Las muestras deben ser entregadas por el interesado con la preparación previa para poder acceder al uso del equipamiento y efectuar la observación según la técnica que requiera, las cuales se describen a continuación. - Por fluorescencia: Se excita una muestra con luz filtrada proviene de una fuente (típicamente una lámpara de descarga de vapor de mercurio gaseoso). La imagen observada es el resultado de la radiación electromagnética emitida por las moléculas que han absorbido la excitación primaria y reemitido una luz con mayor longitud de onda. Para dejar pasar sólo la emisión secundaria deseada, se colocan filtros de emisión apropiados. Las imágenes obtenidas pueden visualizarse a través de la lente ocular o ser capturadas por una cámara digital. - Por campo claro: la luz que emite la fuente de iluminación del microscopio es ópticamente conjugada con en el plano de la muestra a través las lentes del colector y el condensador. Una vez que la luz interacciona con la muestra, la luz reemitida por ella se conjuga ópticamente con el plano del observador para formar la imagen muestra, empleando para ello la lente objetivo y la lente ocular. La imagen de la muestra en el plano del observador es magnificada. Se entrega al solicitante un informe con imáagen adjunta. Dicho informe no posee carácter de certificación.

Microscopio de fluorescencia y/o campo claro Carl Zeiss Axiovert 25

Biología

BIOLOGIA-CELULAR Y MOLECULAR

Varios campos

Ensayos y análisis técnicos

fluorecencia
Microscopio invertido
Campo claro

Servicio dirigido a empresas del sector farmacológico, alimentos y del ámbito científico tecnológico. Aplica la técnica de sacos intestinales de rata o ratón, la cual permite evaluar el efecto de xenobióticos (drogas, toxinas y contaminantes dietarios) o de estados fisiopatológicos sobre la función de barrera intestinal, en particular sobre la permeabilidad.

La técnica consiste en evaluar el pasaje de FITC-Dextran del compartimiento mucoso al compartimiento seroso en sacos intestinales in vitro. Puede realizarse luego de tratamientos in vivo, tanto agudos como crónicos y además pueden realizarse tratamientos agudos in vitro. Se entrega un informe de la muetra analizada, el cual no revierte caracter certificante.

Ciencias Médicas

QUIMICA-FARMACEUTICA

Tecnol.sanit.y curativa-Medicamentos

Fabricación de productos farmaceúticos, sustancias químicas medicinales y productos botánicos de uso farmaceútico

Fisiopatología intestinal
Permeabilidad
Inflamación intestinal
Estrés oxidativo intestinal
Permeabilidad paracelular