EXPRESIÓN DE LOS TRANSPORTADORES CANALICULARES Mrp2 Y Bsep EN UN MODELO DE SINDROME METABÓLICO INDUCIDO POR FRUCTOSA EN RATA

ANDERMATTEN, ROMINA B.; RAZORI, MARIA VALERIA; BAROSSO, ISMAEL R.; CIRIACI, NADIA; SCHUCK, VIRGINIA S.; SANCHEZ POZZI, ENRIQUE J.

Buenos Aires

Congreso; XX Congreso Argentino de Hepatología 2019; 2019

Asociación Argentina para el estudio de la enfermedades del hígado

El sindrome metabólico (SM) es una constelación de anomalías metabólicas, como obesidad, hipertensión, intolerancia a la glucosa, dislipidemia y resistencia a insulina que predisponen a la diabetes tipo 2 y las enfermedades cardiovasculares.La secreción biliar es producida por el hígado mediante un proceso fisiológico altamente regulado por vías de señalización, con el fin de manejar la demanda fisiológica para la disposición de endo y xenobióticos. La regulación se logra modulando la expresión constitutiva, la localización dinámica y la actividad intrínseca de los transportadores localizados tanto en la membrana basolateral como en la membrana canalicular del hepatocito.Objetivo: Caracterizar en el modelo de SM por fructosa los transportadores canaliculares Bsep y Mrp2.Metodología: Ratas Wistar machos, recibieron dieta comercial estándar Ad libitum y agua (C) o agua con fructosa al 10% (p/v) (F) durante 8 semanas. Se mantuvieron bajo condiciones controladas bajo un ciclo fijo de luz/oscuridad.Finalizado el tratamiento, el conducto biliar común de los animales se cateterizó y se recogió bilis por 30 min. Se realizó una punción cardiaca, se sacrificaron los animales y los hígados se pesaron. Se midió los niveles plasmáticos de glucosa, triglicéridos (TG), y la actividad enzimática de la aspartato transaminasa (AST) y fosfatasa alcalina (ALP), para esto se utilizaron kits comerciales obtenidos de Wiener Lab. La prueba de tolerancia a la glucosa (TGlu) se realizó un día antes de sacrificar los animales.El flujo biliar (FB) se determinó por un método gravimétrico.La expresión de Mrp2 y Bsep se evaluó mediante electroforesis en gel de SDS-poliacrilamida y transferencia a membranas de PVDF de homogenados hepáticos de ambos grupos utilizando anticuerpos primarios dirigidos contra Bsep y Mrp2. Se determinó la velocidad de excreción de bilirrubina y sales biliares para evaluar la actividad de Mrp2 y Bsep.Resultados: TGlu: C: (79±12) mg/dl/min F: (115±15)* mg/dl/min TG: C: (0.40±0.08) mM F: (1.17±0.24)* mM. Actividad AST: C: (48±16) F: (90±30)*. FB: C: (3.3±0.1) µl/min/g de hígado F: (2.7±0.1)* µl/min/g de hígado. Expresión de Bsep y Mrp2, C:100±11 F: 70±6* y C:100±16 F: 67±12*, respectivamente. * Estadísticamente diferente de C, (p