Producción del radical hidroxilo, estrés oxidativo y apoptosis en el hígado de ratas diabéticas inducidas por estreptozotocina. Efecto del tratamiento con insulina.

DE FRANCÉS; MT RONCO,; P. INGARAMO;; JA MONTI,; GB PISAN,; AD QUIROGA;; JP PARODY;; JM PELLEGRINO, .; MC CARRILLO,; CE CARNOVALE

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica -Sociedad Argentina de Fisiología. 19 al 22 de noviembre, Mar del Plata; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clínica -Sociedad Argentina de Fisiología.

La producción de especies reactivas del oxígeno (ROS) derivadasde la hiperglicemia son mediadores de las complicacionesen el estado diabético. En el presente trabajo, analizamos los efectosde la diabetes y del tratamiento con insulina sobre la produccióndel radical hidroxilo (·OH), el estrés oxidativo y la víamitocondrial de apoptosis en el hígado de rata. Ratas Wistarmacho adultas fueron distribuidas en tres grupos: control (C) (buffercitrato de sodio, ip), diabéticas inducidas por estreptozotocina(DIE) (60mg/kg pc, inyección única ip) y diabéticas tratadas coninsulina (DIE+I) (15 días post-inyección, ratas DIE recibieroninsulina 3 veces al día, por 15 días, s.c.). Todos los animales fueronsacrificados en el día 30. La producción de ·OH fue medidacomo un indicador de la producción de ROS. Se evaluó la relaciónácido 2,3-Dihidroxibenzoico/Ácido Salicílico (2,3-DHB/AS)determinada por HPLC equipado con detector electroquímico.También se determinó por HPLC la lipoperoxidación (comomalondialdehído, MDA) y el porcentaje de glutation oxidado(%GSSG). Las proteínas involucradas en el proceso apoptóticofueron examinadas por Western Blot. Para evaluar apoptosis serealizaron análisis de TUNEL y de actividad caspasa-3. En DIEaumentaron significativamente versus C:·OH, MDA y %GSSG;igualmente se encontraron aumentadas Bcl-xLy Bax mitocondrialesy citocromo c citosólico. La apoptosis fue confirmada por TUNELy actividad caspasa-3. El tratamiento con insulina (DIE+I) disminuyóla producción de ·OH, MDA y %GSSG alcanzando los valoresde C. También disminuyó el nivel de Bax sin afectar ni Bcl-xLni citocromo c, evidenciándose una atenuación de la apoptosiscomparada con DIE. Nuestros Resultados muestran que el estadodiabético aumenta la producción hepática de ·OH y MDA conduciendoa la célula a apoptosis vía la ruta mitocondrial.Significativamente, la insulina mostró tanto efectos anti-oxidantescomo anti-apoptóticos.