Establecimiento de la polaridad migratoria; implicancia del citoesqueleto de actina en la localización polarizada del centrosoma

HIDALGO, FLORENCIA; TONUCCI, FACUNDO; ALMADA, EVANGELINA; ANABELA FERRETTI; VENA, RODRIGO; CRISTIÁN FAVRE; MARÍA CECILIA LAROCCA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión Científica Anual de la SAIC; 2015

SAIC-SAFIS

La generación de un fenotipo migratorio es central en procesos tandiversos como la diferenciación embrionaria y la metástasis tumoral.Un evento temprano es la generación de un eje antero-posterior Golgi(AG)-centrosoma (Ct)-núcleo (N). AKAP350 (A350) y CIP4 sonproteínas de ensamblaje, que modulan la dinámica del citoesqueletocelular. Previamente demostramos que A350 recluta CIP4 al AG y alCt, y que ambas proteínas participan en el establecimiento de lapolaridad migratoria. Nuestro objetivo fue evaluar si el citoesqueletode actina está implicado en ese mecanismo. Células con perdida enla expresión de A350 (A350KD) o de CIP4 (CIP4KD); o condeslocalización centrosomal de A350 (A350CTD) fueron pretratadascon la droga desectructurante de actina citocalasina D y luegosometidas a ensayos de ?wound-healing?. Analizamos la polaridadmigratoria mediante microscopia confocal de inmunofluorescencia.Determinamos la distancia del centroide del N y del Ct al frente demigración, relativa a la distancia del centroide de la célula.Observamos que el pretratamiento con Citocalasina D (Cito+)normalizó la ubicación del Ct delante del N en las células con pérdidaen la función de ambas proteínas. (Distancia(%): Cito-: control(C): N -17±3, Ct 2±10; A350KD: N -20±4, Ct -30±9*; A350CTD: N -21±3, Ct -20±9*; CIP4KD: N -25±2, Ct -36±7*; Cito+: C: N -23±5, Ct 2±10;A350KD: N -20±4, Ct 17±9#; A350CTD: N -18±4, Ct 10±6#; CIP4KD:N -25±2, Ct -8±8#.*p