Expresión molecular y funcional de aquaporina-8 en membrana canalicular de hepatocitos con colestasis inducida por estrógenos.

FLAVIA I. CARRERAS; GUILLERMO L. LEHMAN; RAÚL A. MARINELLI

BUENOS AIRES

Congreso; XXII CONGRESO LATINOAMERICANO Y 1RO IBEROAMERICANO DE CIENCIAS FISIOLÓGICAS; 2006

Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

El canal de agua aquaporina-8 (AQP8) facilita el transporte de agua a través de la membrana canalicular del hepatocito durante la formación de la bilis. Nuestros recientes estudios indican que en un cuadro de disfunción secretora biliar (i.e. la colestasis hepatocelular inducida por estrógenos) la expresión hepática de AQP8 está disminuida. Los objetivos de este trabajo son estudiar, en colestasis inducida por estrógenos, (i) la expresión molecular y funcional de AQP8 directamente en membrana hepática canalicular y (ii) los mecanismos de disminución de la expresión de AQP8. Metodología y Resultados: La colestasis fue producida por administración del estrógeno etinilestradiol (EE) (5 mg/kg p.c., s.c.) durante 5 días. Membranas canaliculares altamente purificadas fueron preparadas por fraccionamiento subcelular y ultracentrifugación en gradientes de sacarosa. Por inmunobloting, se encontró la AQP8 significativamente disminuída (-60%; P<0,05). La permeabilidad osmótica al agua de la membrana canalicular (Pf), medida por espectrofotometría de stopped-flow, también disminuyó en colestasis (Pf = 73 ± 1 vs. 57 ± 2 mm.sec-1, P<0,05). En el hígado de ratas tratadas con EE, el ARNm de AQP8, medido por Northern blot, aumentó significativamente un 115%, sugiriendo una regulación postranscripcional. Conforme a esto, en hepatocitos en cultivo primario, el tratamiento con el inhibidor lisosomal leupeptin previno completamente la disminución proteica de AQP8 inducida por estrógenos. Conclusión: la colestasis por EE disminuyó la expresión de AQP8 en la membrana canalicular, posiblemente mediante degradación lisosomal. La expresión defectuosa de AQP8 canalicular está asociada a una disminución en la permeabilidad al agua de la membrana. La expresión canalicular defectuosa de AQP8 contribuiría a la disfunción secretora biliar de los hepatocitos en la colestasis hepatocelular inducida por estrógenos.