INCAPE 05401
INSTITUTO DE INVESTIGACIONES EN CATALISIS Y PETROQUIMICA "ING. JOSE MIGUEL PARERA"
Unidad Ejecutora - UE
congresos y reuniones científicas
Título:
Aplicación de metodología de superficie de respuesta para el desarrollo de una técnica de dosaje de lípidos intracelulares. Evaluación de sus parámetros estadísticos
Autor/es:
LOVATO, MELISA BELEN; GIORDANO, PABLO CESAR; BECCARIA, ALEJANDRO JOSE
Lugar:
La Plata
Reunión:
Congreso; 8vo Congreso Argentino de Quimica Analitica; 2015
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Químicos Analiticos
Resumen:
La demanda energética es suplida con combustibles de origen fósil, que poseen numerosas desventajas. Las microalgas son una alternativa para la producción de biodiesel y dicha producción debe ir acompañada con el desarrollo de técnicas que permitan cuantificar el contenido lipídico sin necesidad de realizar lisis celular, lo cual se puede lograr empleando técnicas fluorescentes. Para alcanzar este objetivo se aplicó metodología de superficie de respuesta construyendo un diseño central compuesto, y se evaluaron el tiempo de incubación (TI) (2 a 10 min), y concentraciones de Rojo de Nilo (RN) (20 a 200 mgL-1) y de biomasa de Chlorella sp. (X) (1x102 a 1x10 7 celsmL-1). La respuesta se ajustó a un modelo cuadrático y se aplicó la función deseabilidad para obtener una combinación de valores de los factores que permita maximizar la intensidad de fluorescencia. Como resultado, la combinación óptima sugerida fue: TI=2 min, RN=100 mgL-1 y X=1x105 cels.mL-1, la cual fue verificada experimentalmente.Una vez definidas las condiciones de dosaje, se confeccionaron curvas de calibrado con aceites de origen animal y vegetal en un rango de 0 a 300 mgL-1. Para tal fin se empleó una técnica puesta a punto previamente en el laboratorio: adición de 10 µL de RN (100 mgL-1) a 990 µL de cada analito disuelto en una mezcla de isopropanol-agua. Al cabo de 2 min, se obtuvo la lectura de intensidad de fluorescencia de cada muestra. Luego se determinaron parámetros analíticos de la técnica desarrollada como sensibilidad analítica, límite de detección y límite de cuantificación.Como conclusión, se desarrolló una metodología espectrométrica utilizando como colorante una solución de Rojo de Nilo, la cual insume poco tiempo y trabajo, como así también mínimas cantidades de biomasa y colorante.
