Generación de insumos para el desarrollo de metodología de detección rápida de Virus Respiratorio Sincicial (VRS)

PERI IBAÑEZ E.S; SEVILLA BACHILLER TERUELO M.; FLORES C.Y.; AGUIAR C.; TEMPRANA C.F.; ARGÜELLES M.H; CASTELLO A.A.; GLIKMANN G; MANDILE M.G.; SILVESTRE D.; GRASSELLI, M.

Quilmes

Simposio; 3ra Reunión de Jóvenes Investigadores de Ciencia y Tecnología - Simposio de Biología y Bioquímica; 2018

Universidad Nacional de Quilmes

La infección respiratoria aguda (IRA) producida por VRS es una de las principales causas de hospitalización de lactantes y niños y de una elevada morbilidad y mortalidad entre ancianos y adultos con condiciones debilitantes. El diagnóstico preciso y rápido disminuye el uso innecesario de antibióticos y pruebas adicionales de laboratorio el tiempo de hospitalización y la transmisión intrahospitalaria. En la actualidad, la inmunofluorescencia es el método de detección rutinario, aunque posee un elevado coste y complejidad asociados. Es por ello que ha surgido la necesidad de implementar métodos POC (Point of Care) como alternativos a la inmunofluorescencia. Estos métodos suelen tener buena sensibilidad y especificidad en casos pediátricos mientras que en adultos mayores e inmunocomprometidos la sensibilidad es considerablemente menor. Por esto, se advierte la necesidad general de incorporar innovación para mejorarla sensibilidad de este tipo de metodología. Actualmente nos encontramos en el proceso de generación de anticuerpos monoclonales anti-VRS y de anticuerpos policlonales purificados y absorvidos a partir de los cuales se evitarían reacciones cruzadas, y la posibilidad de incrementar la sensibilidad anulando reactividades inespecíficas. Se evaluaron técnicas de flujo a través de membranas de nanocanales (IF, inmunofiltración) e inmunocromatografía de flujo lateral (ICFL) sobre membranas de nitrocelulosa utilizando nanopartículas de oro, utilizando lotes de VRS humano como material antigénico estándar y anticuerpos IgG policlonales anti-VRS (purificados con columna de sepharosa con proteína G y albúmina, LAMABIO/UNQ). Se testearon distintas condiciones de reacción, reactantes y varias opciones de soportes de muestras y tipo de partículas para flujo lateral. Si bien, para la IF se obtuvieron resultados satisfactorios en cuanto a sensibilidad y especificidad, es necesario probar distintas condiciones de reacción para aumentar la confiabilidad del ensayo, entre ellas, la utilización de anticuerpos monoclonales en reemplazo a los IgG policlonales.