DESARROLLO DE METODOLOGÍA RÁPIDA DE DETECCIÓN DE ROTAVIRUS HUMANOS EN ESPECÍMENES CLÍNICOS

AGUIAR, C.; ARGÜELLES, M.; MANDILE, M.; GLIKMANN, G.; SILVESTRE, D.; GRASSELLI, M.; PERI IBAÑEZ, ESTEFANÍA SOLEDAD; FLORES C.Y; TEMPRANA C.F; ALEJANDRO CASTELLO

Encuentro; 3ra Reunión de Jóvenes Investigadores de Ciencia y Tecnología; 2018

Los rotavirus del grupo A (RVA) son una causa importante de morbi-mortalidad en niños pequeños en todo el mundo. Si bien, las vacunas licenciadas han demostrado ser efectivas en países de medio a alto nivel socioeconómico, en regiones de bajos ingresos y pobres condiciones socio-sanitarias muestran un menor rendimiento. Por ello, es importante el establecer estrategias para evaluar el impacto de la vacunación en zonas de bajo nivel socioeconómico y con déficits en higiene y sanitación del Gran Buenos Aires y otras regiones del país. En este contexto, el presente trabajo consiste en el desarrollo de herramientas para detección de RVA, factibles de utilizarse en cualquier servicio básico de salud por personal sin entrenamiento.Se desarrollaron prototipos de metodologías de inmunofiltración (IF), e inmunocromatografía de flujo lateral (ICFL). Se evaluaron condiciones de reacción y reactantes, utilizando nanopartículas de oro como partículas detectoras, y se testearon con muestras clínicas de la colección del LIV. Además, se llevó a cabo la validación de la ICFL, y la comparación de performance y sensibilidad por diluciones seriadas contra un método similar de origen comercial. Para la IF se obtuvieron resultados satisfactorios en cuanto a sensibilidad y especificidad. Sin embargo, es preciso seguir trabajando en las condiciones de reacción y formato del ensayo para poder llevar a cabo su validación.La ICFL mostró un 82% de sensibilidad y 100% de especificidad contra el ELISA de referencia, habiendo coincidido totalmente con el método comercial. Se observaron diferencias de sensibilidad entre diluciones seriadas que evidencian la gran variabilidad en las matrices de cada ensayo y en la composición de las muestras. Es importante tener esto en cuenta para la aplicación de metodologías alternativas. Si bien el prototipo de ICFL alcanza un buen desempeño, se continúa trabajando en una confección semi-automatizada que permita una producción a escala media.