Estudio molecular del gen KRTAP7 en la Llama (Lama glama)

FRANK EDUARDO NARCISO; DI ROCO FLORENCIA; DAVERIO MARÍA SILVANA; VIDAL RIOJA LIDIA; SILBESTRO MIRIAM; FRANK EDUARDO NARCISO; ANELLO MELINA; DAVERIO MARÍA SILVANA; DI ROCO FLORENCIA; VIDAL RIOJA LIDIA; SILBESTRO MIRIAM; ANELLO MELINA

LA PLATA

Jornada; II Jornada de pequeños rumiantes y camélidos sudamericanos; 2017

Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales, UNLP

La Llama argentina posee una excelente aptitud de producción de fibra. En esta especie, el diámetro y el tipo de fibra son dos aspectos importantes ya que determinan el precio en el mercado nacional. En las últimas décadas, el progreso de la genética molecular ha permitido la aplicación de nuevas herramientas para el estudio de genes de interés productivo. Por eso, desde nuestro laboratorio hemos iniciado un proyecto sobre el estudio de genes vinculados a la estructura y propiedades de la fibra en las Llamas. Se sabe que la fibra es una estructura altamente organizada y casi la totalidad de la misma (90%) se compone de la corteza que consta de filamentos intermedios de queratina (KIFs) embebidos en una matriz de proteínas asociadas a queratina (KAPs). El contenido y composición de éstas últimas tiene un efecto importante en la determinación de las características de la fibra y de la lana. KAP7 pertenece a la familia de proteínas ricas en glicina y tirosina (HGT-KAP) y está codificada por un único gen, KRTAP7, que se expresa en folículos de fibras en crecimiento (Yu et al. 2004). Por lo tanto, el objetivo de este trabajo fue caracterizar este gen en Llamas y estudiar su variabilidad. Se seleccionaron 2 muestras como referencia para determinar la secuencia nucleotídica y describir el gen, las cuales se amplificaron por PCR utilizando un par de cebadores diseñados sobre la secuencia de KRTAP7 del genoma de la alpaca depositado en la base de datos Ensembl. Para identificar polimorfismos se analizaron 100 muestras mediante la técnica de HMR (High Resolution Melt), utilizando un par de cebadores diseñados para tal fin. Los animales que presentaron una curva diferente fueron secuenciados para identificar el genotipo. Se obtuvo la región codificante del gen que consta de un único exón de 264pb que codifica una proteína de 87 aminoácidos. La secuencia obtenida incluyó además dos fragmentos de 37pb y 330pb que corresponden a las regiones 5´y 3´ no traducidas (UTR). El análisis de las curvas de HRM permitió detectar cuatro polimorfismos de nucleótido simple (c.99C>T; c.185G>A; c.198T>C y c.237C>G). En este trabajo se logró caracterizar por primera vez el gen KRTAP7 de la Llama e implementar una metodología de screening que posibilitó detectar polimorfismos nuevos en este gen de manera rápida y sencilla.