Evaluación de la Actividad de Extractos de Annona cherimola Mill. (Annonaceae) encapsulado en Liposomas en Leucemia Linfática Crónica.

J.A. MONTANARI; G.H. MARIN; G.O.HAAG; ALONSO, S. DEL V.; E. MANSILLA; M.E. DEL VALLE; M.A ROSELLA

Bariloche, Rio Negro

Jornada; XXIII Congreso Farmacéutico Argentino y I Jornadas Rionegrinas de Psicofármacos; 2017

Introducción: Las hojas de A.cherimola se utilizan en la medicina tradicional para el tratamiento de la diarrea, los traumatismos y el cáncer especialmente por su parecido con la "Graviola".Objetivos: Testear in vitro la acción antitumoral de extractos y nanopartículas de A.cherimola sobre células de B-CLL intentando mejorar la penetración, selectividad y potencia antineoplásica de dichos extractos en las células leucémicas.Metodología:Se realizó una decocción y fraccionamiento de A.cherimola. Se probó la capacidad de dichos extractos de inducir apoptosis in vitro sobre células B-CLL cultivadas 24, 48 y 72 hs con concentraciones decrecientes en RPMI1640. El grado de apoptosis y muerte celular se comprobó mediante uso de colorantes vitales y citometría de flujo.Los extractos más activos se encapsularon en liposomas de fosfatidilcolina de soja, tamaño 250nm marcados con Rhodamina, por la técnica de formación de films, resuspensión, sonicación y pasaje por extrusor (J. Montanari, 2013). El tamaño fue determinado por dispersión de luz dinámica.Los liposomas con extracto fueron probados sobre las células B-CLL nuevamente. Realizando mediciones de penetración con microscopio de fluorescencia confocal a 5, 30 y 60 minutos.se aplicaron las mismas tecnicas para estimar los niveles de apoptosis y muerte celular.Resultados y Discusión: Se testearon con células de B-CLL siete extractos de A.cherimola: 1. Acuoso infusión total y fracciones de 2. cloroformo, 3. n-butanol y 4. metanol, 5. acuoso remanente, 6. acetato de etilo, 7. cloroformo 2.La mayor actividad pro-apoptótica ocurrió luego de 24 hs de cultivo por acción de los extractos: 1 92%; 2 80 % y 3 60 %.Las nanopartículas 1, 2 y 3 cargadas con los extractos en una concentración de 1/320 mostraron porcentajes de apoptosis de células tumorales similares a las obtenidas con extractos en suspensión a 24 hs de cultivo. El extracto número 1 administrado en forma de nanopartícula fue el único que demostró niveles de apoptosis en células de B-CLL de hasta el 90% aún en concentraciones de 1/640. Los linfocitos normales controles mostraron el mismo porcentaje de apoptosis que cuando se usaron los extractos en suspensión.Conclusiones: El extracto acuoso de A.cherimola es potencialmente efectivo para el tratamiento de B-CLL. Los linfocitos normales no son afectados significativamente por estos extractos sugiriendo un alto nivel de selectividad y seguridad biológica de los mismos.