Alta Sensibilidad al H2O2 en Células de Saccharomyces cerevisiae que Expresan la Proteína Transportadora de Esteroles de Yarrowia lipolytica

GIANOTTI, ALEJO R.; SCOTT, CINTHIA Y.; ERMÁCORA, MARIO R.; FERREYRA, RAUL G.

Bernal

Jornada; 2° Jornadas de Doctorandos y Estudiantes Avanzados de Ciencia y Tecnología; 2015

de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes

ALTA SENSIBILIDAD AL H2O2 EN CÉLULAS DE Saccharomyces cerevisiae QUE EXPRESAN LA PROTEÍNA TRANSPORTADORA DE ESTEROLES-2 DE Yarrowia lipolyticaAlejo R. Gianotti1,2, Cinthia Y. Scott1, Mario R. Ermácora1,2, y Raul G. Ferreyra1,21Departamento de Ciencia y Tecnología, Universidad Nacional de Quilmes. 2Grupo Vinculado de Biología Estructural y Biotecnología ? IMBICE-CONICET-CCT La Plata.alejogianotti@yahoo.com.arLas proteínas transportadoras de esteroles (SCP-2) son portadores lipídicos no específicos implicados en la captación, transferencia y metabolismo de colesterol, ácidos grasos y otros lípidos. SCP-2 es encontrada en todos los dominios de la vida, tanto como simple polipéptido como formando parte de proteínas multidominio. Yarrowia lipolytica es una levadura de alto catabolismo lipídico. El gen que codifica SCP-2 en Y. lipolytica (YLSCP-2) fue clonado en nuestro laboratorio y expresado en Escherichia coli. YLSCP-2 es una proteína básica soluble de 128 residuos que une lípidos y es inducible por ácidos grasos [1]. Se localiza preferentemente en los peroxisomas, e in vitro transfiere lípidos unidos hacia membranas fosfolipídicas por un mecanismo colisional [2]. Su estructura cristalina fue resuelta por nuestro grupo [3]. Para evaluar posibles funciones in vivo de YLSCP-2, la proteína fue expresada en Saccharomyces cerevisiae, organismo que carece de SCP-2. Observamos que la nueva cepa es mucho más sensible al H2O2 que su cepa parental. Hipotetizamos así que YLSCP-2 estaría exacerbando la acción deletérea de ciertos lípidos peroxidados, a través de su canalización y diseminación a estructuras celulares esenciales. Paralelamente, estamos generando cepas de Y. lipolytica carentes de YLSCP-2 para evaluar las consecuencias de su ausencia en esta levadura.[1] Ferreyra et al. (2006) A Yeast Sterol Carrier Protein with Fatty-Acid and Fatty-Acyl-CoA Binding Activity, Arch. Biochem. Biophys., 453(2), 197-206.[2] Falomir et al. (2009) Biophysical Characterisation and Urea-Induced Unfolding of Recombinant Yarrowia lipolytica Sterol Carrier Protein-2, Biophys. J., 97(1), 248-56.[3] Perez De Berti et al. (2013) The Crystal Structure of Sterol Carrier Protein 2 from Yarrowia lipolytica and the Evolutionary Conservation of a Large, Non-Specific Lipid-Binding Cavity. J. Struct. & Func. Genomics, 14(4), 145-53.Eje: Bioquímica y Biología Celular y EstructuralModalidad de presentación: Póster