Comparación del daño cromosómico inducido a largo plazo a nivel telomérico por mutágenos químicos de diferente modo de acción en células de mamífero

PAVIOLO, N.S.; CASTROGIOVANNI, D.C.; BOLZÁN, A.D.

Mar del Plata

Encuentro; IX Encuentro de Biólogos en Red; 2014

Asociación de Jóvenes Investigadores en Formación

Se analizó el daño inducido a largo plazo por los antibióticos antitumorales bleomicina (BLM), estreptonigrina (EN) y estreptozotocina (EZ) sobre los telómeros de los cromosomas de células de mamífero. El objetivo de este trabajo fue evaluar si los mutágenos químicos mencionados inducen inestabilidad telomérica a largo plazo en la progenie de las células tratadas con dichos mutágenos. Se aplicó la técnica de Hibridación In Situ Fluorescente (FISH) con sonda telomérica de tipo PNA, sobre extendidos cromosómicos de fibroblastos desdiferenciados de rata, obtenidos a partir de tejido adiposo (línea celular ADIPO-P2) y expuestos en faz logarítmica de crecimiento a 2,5 µg/ml de BLM, 100ng/ml de EN y 2mM de EZ a 37ºC, durante 30 (BLM y EZ) o 20 minutos (EN). Los cultivos fueron cosechaados a los 15 días luego del tratamiento con cada uno de los mutágenos. En todos los casos, el análisis citogenético realizado mediante microscopía de epifluorescencia reveló un incremento significativo en la frecuencia de aberraciones cromosómicas a los 15 días postratamiento en las células tratadas con los mutágenos, con respecto a las células control (p<0,05). Nuestros resultados demuestran que tanto la BLM como la EZ inducen inestabilidad telomérica, manifestada como cromosomas incompletos (CI) y su correspondiente fragmento terminal (FT), y disfunción telomérica (manifestada como pérdidas o duplicación de señales teloméricas y fusiones teloméricas). Por otro lado, si bien la EN también induce CI y FT, la mayoría de las aberraciones inducidas por EN a los 15 días luego del tratamiento, suponen disfunción telomérica.(pérdida y duplicación de señales teloméricas). En conclusión, nuestros resultados indican que el efecto residual de los diferentes mutágenos sobre los telómeros de células de rata persiste por lo menos hasta 15 días luego del tratamiento.