Análisis bioinformático de puntos de ruptura de una variante estructural del F8 originada por recombinación no-homóloga causal de Hemofilia A severa.

ZIEGLER B; ROSSETTI LC; WAISMAN K; RADIC CP; MARCHIONE VD; ABELLEYRO MM

CABA

Congreso; XLVIII Congreso Argentino de Genética; 2020

SAG

Aunque el 8-15% de las Hemofilias A severas (HAS) soncausadas por grandes deleciones del F8, muy pocas son caracterizadas ymenos aún investigadas para elucidar su mecanismo de origen. Aquí se abordanestos objetivos en un paciente con HAS usando métodosbioinformático-estadísticos originales, analizando motivos recombinogénicos enlas rupturas para elucidar su mecanismo molecular. Las regiones de incerteza 5y 3? del rearreglo fueron acotadas por inverse shifting-PCR y sediseñaron PCR directas para secuenciar el punto de recombinación. En intervalosde 50 pb con centro en los puntos de ruptura se estudiaron motivos del ADNasociados a inestabilidad genómica, evaluando su significancia estadística conhipótesis nulas estimadas por valores esperados en puntos de rupturaartificiales aleatorios en Xq28 (n=240) y en las frecuencias de bases. Ladeleción NC_000023.11:g.154981972_154989056delinsG, mostró la inserción de unabase sin microhomologías. En el extremo 3? se detectó la secuenciarecombinogénica Jurka, una estructura secundaria de ADN estable y un elementoAluSx, y en 5?, un motivo Murine parvovirus recombination hotspot. Estoshallazgos apoyan la participación de la maquinaria de retrotransposición,estructuras secundarias y secuencias recombinogénicas en la susceptibilidad asufrir rupturas localizadas e indican al sistema de reparación de extremos nohomólogos (NHEJ) como el mecanismo molecular más probable.