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Introducción: La mielofibrosis (MF) es un trastorno crónico, generalmente idiopático, caracterizado por fibrosis de la médula ósea, esplenomegalia y anemia con glóbulos rojos inmaduros en forma de lágrima (dacriocitos) y hematopoyesis extramedular. La enfermedad se presenta como MF primaria (MFP) o secundaria como transformación de una policitemia vera (MF post PV) o una trombocitemia esencial (MF post TE) previas. La MF posee riesgo de progresión leucémica, presentar eventos vasculares o infecciones recurrentes. Dado que tanto la MFP como la secundaria se incluyen dentro de las neoplasias mieloproliferativas Philadelphia negativas, se caracterizan por la ausencia del reordenamiento BCR-ABL1 y presencia de mutaciones somáticas vinculadas con la iniciación y progresión de la mieloproliferación clonal.Objetivo: determinar el perfil mutacional de una población de MF, evaluando las mutaciones iniciadoras (drivers) en los genes: JAK2, CALR, MPL y las mutaciones cooperadoras en los reguladores epigenéticos ASXL1, IDH1 e IDH2 y su implicancia clínica.Material y Métodos: A partir de una muestra de sangre periférica se realizó la extracción de ADN de 40 casos con diagnóstico de MF: 32 con MFP, 4 con MF post PV y 4 con MF post TE. El análisis de las mutaciones drivers se realizó siguiendo el algoritmo de frecuencia de aparición de cada una de ellas teniendo en cuenta que son mutuamente excluyentes. Por lo tanto primero se estudió la mutación JAK2V617F mediante una PCR alelo específica. En los casos negativos para esta mutación se investigaron las mutaciones del exón 9 del gen CALR, y por último se analizó el exón 10 del gen MPL mediante PCR y posterior secuenciación. La presencia de estas mutaciones se considera un criterio mayor para el diagnóstico de MF.Respecto a las mutaciones en reguladores epigenéticos se analizó el exón 13 del gen ASXL1(Additional Sex Combs Like1) y las mutaciones en los residuos R132 (exón 4) del gen IDH1(Isocitrate Dehydrogenase1) y R140 y R172 (exón 2) del gen IDH2 (Isocitrate Dehydrogenase 2) Estas mutaciones se analizaron mediante screening por CSGE y/o SSCP y posterior secuenciación.Resultados Se identificaron las siguientes mutaciones iniciadoras: JAK2V617F en 24/40 (60%); CALR en 7/40 (17,5%) de tipo I: 4 casos y de tipo II: 3 casos; MPL 2/40 (5%) (W515K, W515L), indicando que 33/40 (82,5%) de los casos analizados presentaron alguna de las mutaciones asociadas con la etiopatogenia de la MF, mientras que los restantes 7/40 (17,5%) fueron triple negativos (TN). Las mutaciones en el gen ASXL1 se detectaron en 5/40 (12,5%): p.E635RfsX15, p.I641GfsX14, p.H995QfsX2, p.C730AfsX14 y p.E1102D, las tres primeras fueron indels no reportadas en la literatura. Los pacientes portadores de mutaciones en ASXL1 fueron JAK2V617F negativos (2 TN, 1 con W515K, 1 con W515L y 1 con CALR tipo I), todos presentaron mal pronóstico con evolución leucémica o muerte relacionada por progresión de enfermedad. El análisis de las mutaciones en IDH1 (R132) e IDH2 (R140, R172) mostro que ninguno de los pacientes presentaba alteraciones en estos residuos.Conclusiones: Nuestros resultados revelan que el 82,5% de nuestros pacientes presentaban alguna de las tres mutaciones iniciadoras mostrando alta asociación de las mismas con el diagnóstico de MF. El estudio de las mutaciones cooperadoras en reguladores epigenéticos permite investigar la presencia de subclones de mayor capacidad proliferativa asociados con progresión de enfermedad. En nuestra experiencia las mutaciones en IDH1/IDH2 estuvieron ausentes en todos los casos analizados indicando que estas mutaciones serían de muy baja prevalencia. Respecto a la presencia de mutaciones en ASXL1 se detectó en 12,5% de los pacientes y en todos los casos se asoció a mala evolución, indicando que mutaciones en este gen determinarían subclones de mayor agresividad. Por lo tanto el análisis del perfil mutacional en pacientes con MF permitiría orientar hacia una terapia adaptada al riesgo.