Determinación de polimorfismos en el gen CX3CR1 de pacientes infectados con E. coli productor de toxina Shiga que progresan o no a Síndrome Urémico Hemolítico

PANEK CA; RAMOS MV; MEJIAS MP; FERNANDEZ-BRANDO RJ; BENTANCOR L; EXENI R,; PALERMO MS

Mar del Plata, Prov Buenos Aires, Argentina

Congreso; Reunión Anual de la SAI y la Sociedad Rioplatense de Citometría de Flujo; 2009

La forma típica del síndrome urémico hemolítico (SUH), se desarrolla secundariamente a la infección con cepas enterohemorrágicas de Escherichia coli productoras de toxina Shiga (STEC) en el 10-15% de los niños infectados. Se caracteriza por anemia hemolítica microangiopática, trombocitopenia y daño renal agudo. Recientemente, hemos demostrado que los pacientes con SUH presentan bajo porcentaje de células CX3CR1+ (Monocitos y NK) en sangre periférica, correlacionándose en forma negativa con la severidad del SUH, y la presencia de células CX3CR1+ en biopsias de pacientes. Por otro lado, se han identificado dos polimorfismos (V249I y T280M) en el marco de lectura abierto del gen CX3CR1. Diversos estudios han señalado a estos polimorfismos como factores de riesgo ante algunas enfermedades. Entonces, el objetivo de este trabajo es investigar si un polimorfismo determinado se asocia con una mayor probabilidad de desarrollar SUH. Métodos: Se realizó la extracción del DNA de orina de pacientes infectados con STEC (I-STEC), de pacientes con SUH y controles normales (C). Se amplificó el genoma total y una secuencia de 588 pares de bases correspondiente al gen CX3CR1 por PCR. Los productos obtenidos fueron digeridos con las enzimas Psp1406I y BsmBI. Los polimorfismos V249I y T280M, alteran el sitio de restricción de dichas enzimas pudiendo ser diferenciados en geles de agarosa por sus patrones de restricción. Resultados: En pacientes con SUH (n=7) se observaron los genotipos: VV-TT (n=4); VI-TT (n=2); VI-TM (n=1). El paciente I-STEC (n=1) mostró genotipo VV-TT y los C (n=3), genotipo VV-TT. Conclusiones: Demostramos que el método empleado a partir de orina permite detectar todas las variantes polimórficas de CX3CR1 reportadas. Por otra parte, aunque el número de pacientes evaluados es muy pequeño, fue llamativo que solo la mitad tenga el genotipo normal. Sin embargo, aún no es posible realizar asociaciones entre polimorfismos y predisposición a desarrollar SUH.