Participación de las Trampas extracelulares de neutrófilos circulantes en el desarrollo del Síndrome Urémico Hemolítico Típico.

EXENI RAMON; RAMOS MARIA V; PINEDA GONZALO; SANTIAGO ADRIANA; FERNANDEZ BRANDO RJ; TREVANI A; PALERMO MS

CABA

Congreso; 6° Congreso Argentino de Nefrología Pediátrica.; 2015

Sociedad Argentina de Pediatría

INTRODUCCIÓN El Sindrome Uremico Hemolitico típico(SUH), es causado por bacterias productoras de toxina Shiga (Stx).La respuesta inflamatoria mediada por los neutrófilos (PMN) es esencial para su desarrollo. Los PMN liberan trampas extracelulares (NETs), implicadas en varias enfermedades. Las NETs contienen ADN, histonas y proteínas propias del PMN, elastasas y mieloperoxidasas. OBJETIVO Investigar la presencia de NETs en niños con SUH típico. MATERIAL Y METODOS Se estudiaron 15 pacientes con SUH durante la fase aguda y 15 niños sanos. Los PMN circulantes se aislaron por centrifugación en Ficoll-Hypaque y sedimentación en dextran. Analizamos la capacidad de los PMN para inducir NETs incubando 2x106 PMN en medio (basal) o con acetato de forbol miristato (PMA) (50 ng/mL) 4 h a 37°C. La concentración de ADN en el sobrenadante de los PMN y el DNA circulante en el plasma se midió con el colorante SYBR® Gold (Invitrogen, CA, USA). La intensidad de fluorescencia medida a longitud de onda de absorción y emisión 485 nm y 530 nm , respectivamente, refleja la cantidad de ADN libre. La actividad de elastasa se midió por espectrofotometría (abs 405 nm) con el sustrato N-metoxisuccinil-Ala-Ala-Pro-Val. RESULTADOS Se observó un aumento de ADN circulante en el plasma de los niños con SUH típico vs los niños sanos (sanos:5,1±0,5; SUH:10±0,5*ug/ml, n=15, *p