Aumento de la infectividad en el ratón de Escherichia coli O157:H7 de origen humano luego del pasaje por el tracto gastrointestinal murino

FERNANDEZ BRANDO, R; MILIWEBSKY, E; BENTANCOR, L;; BASCHKIER, A;; RAMOS, MV; ZOTTA, E;; RIVAS, M;; PALERMO, MS

Córdoba

Congreso; . XI CONGRESO ARGENTINO DE MICROBIOLOGIA,; 2007

ASOCIACION ARGENTINA DE MICROBIOLOGIA

Entre las cepas de <i>E. coli<i> enterohemorrágicas (EHEC) patógenas para el hombre, se destaca <i>E. coli<i> O157:H7 por su alta asociación clínica y epidemiológica con el desarrollo de Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). Estas cepas son muy poco patógenas para el ratón, lo que dificulta el establecimiento de modelos animales accesibles para el estudio de las primeras etapas de la enfermedad. Previamente habíamos establecido una mayor susceptibilidad de ratones Balb/c durante el destete (18-19 días) a la infección por EHEC aisladas de pacientes con SUH (cepa 125/99). Aunque el conocimiento de los factores que aumentan la transmisión de patógenos dentro de una población es crítico para la prevención y el control de enfermedades infecciosas, es poco lo que se sabe acerca de ellos. Evidencias epidemiológicas indican que la infección horizontal entre animales de una misma especie requiere dosis significativamente menores a las usadas con bacterias cultivadas en el laboratorio. Con el fin de evaluar si esto era reproducible en nuestro modelo utilizando la cepa 125/99, la misma fue administrada por vía oral (109 UFC/kg de peso) a ratones al destete. A las 48 h se recolectó materia fecal, de la cual se aislaron colonias O157:H7, determinándose la identidad con la cepa original por PCR, y la capacidad conservada de producir Stx2 por evaluación de toxicidad sobre células Vero. Estas colonias recuperadas (125/99r) fueron congeladas en alícuotas hasta próximo uso. Luego de ser cultivadas en medio LB, se inocularon por vía oral a ratones Balb/c de 18 días a igual dosis que <i>E. coli<i> 125/99 original. Se evaluó mortalidad, daño renal por determinación de urea, excreción bacteriana y colonización por cultivo de materia fecal, intestino delgado y grueso a 48 y 72 h post-inoculación.  Mortalidad: 125/99= 3/17; 125/99r= 8/17 (X2 p<0.06). Todos los animales muertos mostraron daño renal, medido como niveles aumentados de urea plasmática (mg/%): 125/99= 437±131*; 125/99r= 367±.63*; versus el control no productor de Stx2 (<i>E. coli<i> O157:H7 605/03= 53±4), *p<0.01. El recuento de bacterias excretadas en materia fecal a las 48 y 72 h estuvo significativamente aumentado en la cepa 125/99r, respecto a la original: 48 h: 125/99r= mediana 5x106 UFC/g (rango, 600-1x108) (n=5); 125/99=  660 UFC/g (0-9x103) (n=11); 72 h:  125/99r= 2x103 UFC/g (0-4x106); 125/99= 0 UFC/g (0-2x105).  Estos resultados muestran el aumento de la virulencia de la cepa EHEC 125/99 en ratón luego del pasaje por un huésped de la misma especie.