La respuesta inmune a la Lumazina Sintetasa de Brucella abortus (BLS) es modulada por el receptor de inmunidad innata TLR4.

BERGUER, P; MUNDIÑANO ,JULIANA; MARGARITA ISABEL PIAZZON; GOLDBAUM, FERNANDO

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Anual de la SAI y LI Reunión Anual de la SAIC; 2006

BLS es una proteína altamente inmunogénica. Demostramos que activa células dendríticas in vitro induciendo el aumento de moléculas coestimulatorias, la secreción de citoquinas proinflamatorias y los ARNm de quemoquinas, siendo estos efectos dependientes de TLR4. El objetivo de este trabajo es analizar las alteraciones inducidas in vivo por BLS en el sistema inmune y su dependencia de TLR4. Se inocularon ratones BALB/c y C.C3Htlr4lps-d (LPSd) -que no expresan un TLR4 funcional- con 50mg de BLS en la almohadila plantar derecha y PBS en la izquierda. Los resultados se expresan como media±SD (n=6). En BALB/c BLS indujo aumentos significativos en el n° de células en el ganglio poplíteo drenante a las 24h (6.5±0.2vs2.7±0.6 x106). Mediante citometría de flujo encontramos aumentados significativamente los % de células dendríticas, de linfocitos B y CD8+ (CD11c+:5.7±1.2vs3.1±1.1; CD19+:29.4±3.2vs24.1±3.3; CD8+:22.0±1.6vs18.2±0.8) y los % de linfocitos B y CD8+ activados (CD69+/CD19+:58.3±7.8vs17.0±0.9; CD69+/CD8+:9.8±0.4vs4.8±1.0). Ninguno de estos eventos fue observado en ratones LPSd, determinando así su dependencia de TLR4. A las 48h se obtuvieron resultados similares, observándose además aumentos en el %CD44hi/CD8+ en BALB/c (38.2±1.9vs26.1±1.5) y no en LPSd. Se analizó por RT-PCR semicuantitativa el nivel de ARNm de IL-4 en ganglios poplíteos de BALB/c y LPSd a las 48h, encontrándose niveles significativamente mayores en LPSd. Al estudiar la respuesta humoral en LPSd inoculados ip con 100mg de BLS se encontró un alto título de IgG anti-BLS, similar al de BALB/c. Sin embargo, la relación de títulos IgG1/IgG2a anti-BLS resultó mayor en LPSd que en BALB/c (8±0.8vs2±0.5) sugiriendo un mayor predominio de respuesta TH2 en ausencia de TLR4 funcional. Los resultados indican que BLS induce importantes alteraciones en células dendríticas, linfocitos B y CD8+ dependientes de TLR4. La falta de un TLR4 funcional aumenta parámetros característicos de respuestas TH2 frente a BLS.