CONICET | Buscador de Institutos y Recursos Humanos

El influjo de neutrófilos (PMN) al pulmón es uno de los primeros eventos en la patogénesis de la tuberculosis (TB). La activación seguida de apoptosis de los PMN involucra intermediarios reactivos del oxígeno (ROS) y p38. Anteriormente mostramos una mayor inducción de ROS por el aislado clínico de Mtb Ra (linaje LAM) con respecto al aislado M (linaje Haarlem) ambos resistentes a drogas y prevalentes en Argentina. Dado que existiría un efecto cooperativo entre TLR2 y el receptor de b-glucanos (presentes en hongos) dectin-1 sobre la activación de p38 y Syk y la generación de ROS, nuestro objetivo fue evaluar los receptores involucrados y la participación de los a-glucanos en la generación de ROS/apoptosis, ya que representan el 80 porciento de los polisacáridos de la pared del Mtb y unirían sitios de lectina como los b-glucanos. Resultados: ROS, medido como oxidación de 123dihidrorodamina (DHR), correlacionó con la apoptosis medido por unión a Anexina V. Tanto el estallido respiratorio como la apoptosis inducidos por Ra, se anularon bloqueando TLR2, dectin-1 o empleando laminarina, como así también al inhibir Syk o p38. La activación de p38 y Syk fue inducida por Ra y no por M. Determinamos que Ra indujo la formación de lipid rafts (evaluada por citometría de flujo y microscopía) mecanismo que estaría mediado por TLR2. Al eliminar los a-glucanos enzimáticamente de Ra (EnzRa), no indujo ROS ni apoptosis pero no perdió la capacidad de inducir lípid rafts ni de producir IL-8 (medido por ELISA). El estímulo previo con EnzRa no mejoró el ROS generado por M, sugiriendo fallas en la interacción con dectin-1. Además, M indujo poca IL8 con respecto a Ra, lo que sugiere fallas en la interacción con TLR2. La generación de ROS/apoptosis por Mtb dependería de TLR2 y dectin-1/Syk, por lo que diferencias en la composición de la pared representaría un mecanismo de evasión al afectar la interacción con dichos receptores.